核酸探针

摘要： 目的:通过分析GeneXpert MTB/RIF(简称“Xpert”)阳性RNA聚合酶β亚基(rpoB)基因突变的结核病患者中rpoB基因探针的突变分布与频率,阐述利福平耐药决定区的突变特征。方法:连续纳入2019年6月至2020年6月就诊于首都医科大学附属北京胸科医院的Xpert检测阳性且rpoB基因突变的682例结核病患者,其中肺结核618例,肺外结核64例。收集患者临床检测标本,其中痰液465份,支气管肺泡灌洗液153份,脓液37份,胸腔积液19份,便标本7份,脑脊液1份。分析所有Xpert阳性标本中结核分枝杆菌(MTB)的半定量结果及rpoB基因探针的突变分布情况。结果:682份标本中,MTB含量半定量水平为高占6.45%(44/682),中占25.07%(171/682),低占25.51%(174/682),极低占42.96%(293/682)。肺外结核标本中MTB含量半定量极低水平高于肺结核标本[分别为64.06%(41/64)和40.78%(252/618)],差异有统计学意义(χ^(2)=12.83,P<0.001)。标本涂阳率在MTB含量半定量水平为高、中、低和极低水平的标本中分别为84.62%(33/39),64.02%(105/164),27.27%(42/154)和7.84%(20/255)。rpoB基因单探针突变率为92.82%(633/682),双探针突变率为6.89%(47/682),三探针突变率为0.29%(2/682)。单探针突变的标本中,突变率最高的为探针E(74.34%,507/682),其次为探针D(8.80%,60/682);双探针突变的标本中,突变率最高的为探针D+E(4.25%,29/682),其次为探针A+B(1.76%,12/682);2例三探针突变均为探针A+D+E。结论:Xpert阳性rpoB基因突变MTB中以单探针突变为主,在肺结核和肺外结核中最常见的突变探针均为探针E和探针D。

摘要： 新型冠状病毒的全球大流行,给世界人民的生命健康带来了巨大威胁.目前,针对新型冠状病毒的预防和治疗措施仍然非常有限.核酸检测对于实现快速确诊感染病例、排除疑似病例、促进疫情的防控与临床救治至关重要.本文通过综述RT-PCR技术在新型冠状病毒核酸检测中的应用及面临的挑战,总结经过本实验室长时间积累的实践经验,如增加仪器设备、优化实验流程、加强信息化建设、改善工作条件等措施以提高核酸检测的能力和效率,为实验室新型冠状病毒核酸检测提供参考依据.

摘要： 新型冠状病毒的全球大流行,给世界人民的生命健康带来了巨大威胁。目前,针对新型冠状病毒的预防和治疗措施仍然非常有限。核酸检测对于实现快速确诊感染病例、排除疑似病例、促进疫情的防控与临床救治至关重要。本文通过综述RT-PCR技术在新型冠状病毒核酸检测中的应用及面临的挑战,总结经过本实验室长时间积累的实践经验,如增加仪器设备、优化实验流程、加强信息化建设、改善工作条件等措施以提高核酸检测的能力和效率,为实验室新型冠状病毒核酸检测提供参考依据。

摘要： 目的 分析山西省临汾市2019-2020年"探索提高贫困地区肺结核发现"项目实施期间结核病分子生物学核酸检测技术应用情况,为优化临汾市结核病防控策略提供依据.方法 利用《中国疾病预防控制信息系统》及其子系统《结核病管理信息系统》和"探索提高贫困地区肺结核发现"项目月报表相关数据,以2018年数据为基线,对20192020年临汾市及所属项目县(大宁县及永和县)肺结核患者和病原学阳性肺结核患者发现、药物敏感性筛查等情况进行分析.结果 临汾市2018-2020年病原学阳性率分别为29.6％(442/1495)、36.4％(476/1307)和50.5％(652/1292),呈逐年上升趋势,差异有统计学意义(x2趋势=152.410,P=0.000).到2020年,17个县区中,除大宁县及永和县外[69.4％(25/36)、81.8％(18/22)和59.3％(16/27)、66.7％(8/12)],浮山、洪洞、安泽、翼城县的肺结核患者[分别为76.2％(32/42)、64.7％(174/269)、60.0％(9/15)、55.9％(38/68)]和病原学阳性肺结核患者[76.5％(13/17)、70.4％(81/115)、7/7、66.7％(24/36)]超过50％为市级(临汾市第三人民医院)诊断.2018-2020年临汾市药物敏感性筛查率分别为75.1％[229/(442-137)]、88.5％[339/(476-93)]和90.7％[489/(652-113)],呈逐年上升趋势,差异有统计学意义(x2趋势=25.505,P=0.000).2018-2020年大宁县及永和县病原学阳性率分别为31.2％(15/48)、25.0％(14/56)和54.0％(34/63),差异有统计学意义(x2=170.407,P=0.000).2018-2020年,大宁县及永和县初诊患者在市级诊断的比例分别为38.4％(106/276)、43.4％(75/173)和56.3％(98/174),呈逐年上升趋势(x2趋势=36.564,P=0.000).结论 临汾市第三人民医院为临汾市提供了全方位的结核病分子生物学检测服务.应继续优化或完善诊疗流程,达到普通肺结核患者诊疗不出县的分级诊疗要求,同时发挥市级诊断作为区域性结核病分子生物学诊断实验室的作用.

摘要： 以抗体-抗原免疫识别、核酸碱基互补配对识别以及核酸适体-配体识别这3种分子识别方式分类,综述了近几年基于分子识别的细菌检测研究工作进展,总结了细菌检测相关研究存在的一些挑战,并展望了该领域的发展前景.

摘要： 活细胞中存在多种与肿瘤相关的微小RNA(microRNA,miRNA),可为癌症诊断和治疗提供重要且丰富的信息。发展能够在活细胞中同时进行多种低丰度miRNA实时成像的方法对于准确地进行肿瘤临床诊断和预后研究具有重要意义。目前,活细胞miRNA成像技术仍面临着如胞内环境复杂、检测灵敏度低、难以实现多元成像等挑战^([1])。最近,南京邮电大学晁洁、汪联辉教授课题组与上海交通大学左小磊教授课题组合作,报道了一种新的核酸酶编码的多色框架核酸探针,实现了活细胞中两种miRNA高灵敏和高选择性的同时成像。这一研究成果近期发表于美国Analytical Chemistry(10.1021/acs.analchem.0c04092)杂志上^([2])。

摘要： 目的 系统评价GeneXpert MTB/RIF在骨关节结核诊断中的应用价值.方法 应用计算机检索万方、维普、中国知网、PubMed、Embase、Cochrane Library等数据库,收集从建库至2020年5月发表的GeneXpertMTB/RIF诊断骨关节结核的相关文献,然后由2名研究者独立进行文献筛选、数据提取及质量评价.分别采用Reman 5.3和MetaDisc 1.4软件进行文献质量评价和Meta分析.结果 共检索出350篇文献,依据纳入和排除标准,共筛选出来自4个国家的24篇文献,文献中共有3966例临床标本.Meta分析显示以临床综合诊断(CRS)为参考标准,GeneXpert MTB/RIF用于诊断骨关节结核的汇总敏感度和特异度分别为82.9％ (95％CI:81.4％～84.3％)和86.3％ (95％CI:84.3％～88.2％);以结核分枝杆菌培养和绝对浓度法药物敏感性试验(DST)为金标准,GeneXpert MTB/RIF诊断骨关节结核的汇总敏感度和特异度分别为93.9％ (95％CI: 92.2％～95.2％)和52.3％(95％CI:49.9％～54.6％).GeneXpert MTB/RIF诊断利福平耐药骨关节结核也有很高的敏感度(89.5％,95％CI:87.5％～91.4％)和特异度(89.9％,95％CI.85.6％～93.2％).结论 GeneXpert MTB/RIF对骨关节结核和利福平耐药骨关节结核有较高的诊断价值,可作为快速诊断骨关节结核的有效方法.

摘要： 在当前的食品检测工作中,微生物检测是重中之重,为了获得更为精准的食品安全检测结果,多种食品检测技术在不断发展,本文主要对核酸探针检测技术进行分析,此项技术能够在短时间内找到食品内部存在的有毒物质,通过对该技术的应用分析,希望为更多食品检测工作提供参考建议。

摘要： 在当前的食品检测工作中,微生物检测是重中之重,为了获得更为精准的食品安全检测结果,多种食品检测技术在不断发展,本文主要对核酸探针检测技术进行分析,此项技术能够在短时间内找到食品内部存在的有毒物质,通过对该技术的应用分析,希望为更多食品检测工作提供参考建议.

摘要： 目的 探讨ZNA (ZIP Nucleic Acid)探针的PCR性能及其在沙眼衣原体(CT)核酸定量检测中的研究.方法 使用CT阳性质粒,比较偶联不同ZIP数量的ZNA探针的PCR扩增曲线差异;比较ZNA探针与29mer普通Taqman探针(DNA长探针)、20mer普通Taqman探针(DNA短探针)、MGB探针在PCR扩增曲线、反复冻融稳定性及低浓度质粒检出率的差异;使用CT阳性临床样本,比较ZNA探针与DNA长探针、DNA短探针、MGB探针扩增曲线差异及低浓度样本检出率的差异.结果 (1)偶联5个ZIP单位的ZNA探针Ct值和荧光值最优,与偶联1个ZIP的探针相比:Ct值提升1.34(灵敏度提升2.37倍),荧光值提升30％.(2)偶联5个ZIP的ZNA探针的扩增效率是优选的普通Taqman探针和MGB探针的2.14～2.64倍,荧光值高17％～90％.(3)四组探针冻融稳定性结果显示,ZNA探针的稳定性最佳,低浓度(1×104拷贝/mL)的Ct值偏离最小(CV％=1.4),优于DNA长探针、DNA短探针、MGB探针(CV％=1.7～3.7).(4)用35例CT临床样本比较四组探针(DNA长探针、DNA短探针、MGB探针、ZNA探针)的PCR扩增性能,相对于其他三组探针,ZNA探针的扩增灵敏度分别提升1.60倍、0.99倍和1.06倍,且Ct值一致性分析结果显示,ZNA探针对临床样本的检出性能提升更优.(5)使用低浓度质粒模板(分别为200、100、50和10拷贝/mL)比较四组探针的扩增灵敏度,ZNA探针的检出率均优于DNA长探针、DNA短探针、MGB探针;在最低浓度10拷贝/mL时,其他三组探针的检出率只有15％～20％,ZNA探针仍有30％.(6)在20例不同低浓度(分别为200、150、100和50拷贝/mL)临床样本中ZNA探针检出率最高,分别为100％、95％、90％和70％.结论 偶联5个ZIP的ZNA探针的扩增效率、荧光值、冻融稳定性、临床样本的扩增性能及低浓度样本检出灵敏度都优于普通Taqman 探针和MGB探针,ZNA探针可作为一种设计灵活和合成易得的新探针技术,在基因表达领域可进一步提升检测的灵敏度及低浓度样本的检出率.

摘要： MicroRNA(miRNA)在细胞内对基因表达起着非常关键的调控作用.研究microRNA引导的核酸探针自组装体系,实现无需核酸酶催化的miRNA检测对于复杂体系中miRNA分析及miRNA的成像分析具有重要意义.设计了末端荧光标记的茎环结构DNA探针H1和H2.在研究中发现HCR产物通过其单链末端被富集到XO表面，非常适合于miRNA的荧光成像分析。将H1探针固定在磁性微球上，在微球表面进行HCR自组装过程，可以对HCR产物进行分离、富集，并实现目标分子的成像分析。以分子信标作为信号元件，与其完全互补的茎环结构DNA探针作为启动元件，研究了以miRNA作为催化剂的催化自组装体系。

摘要： 用地高辛(DIG)标记本实验室保存的鸭圆环病毒(DuCV)传染性克隆制成核酸探针。特异性结果表明，该探针能与DuCV核酸发生特异性杂交，而与对照的鸭病毒性肝炎I型(DHV-1)病毒、鸭瘟病毒(DPV)的核酸杂交反应为阴性。rn 敏感性结果表明，该探针对DuCV的最低检出量约为5pg。应用该探针对从山东、江苏、四川等地采集的196只鸭病料，共1025份脏器的组织DNA进行检测，结果个体阳性率为33．2％，在各脏器中法氏囊、肝脏、脾脏的DuCV检出率较高，检出率分别为52．3％、49．2％、38．5％。同时对上述样品进行PCR检测，核酸探针检测与PCR检测两种方法的符合率为87．5％。研究结果表明，制备的DIG标记的核酸探针特异性强、敏感性高，适合对DuCV的诊断和流行病学调查。

摘要： 用地高辛(DIG)标记本实验室保存的鸭圆环病毒(DuCV)传染性克隆制成核酸探针。特异性结果表明，该探针能与DuCV核酸发生特异性杂交，而与对照的鸭病毒性肝炎I型(DHV-1)病毒、鸭瘟病毒(DPV)的核酸杂交反应为阴性。敏感性结果表明，该探针对DuCV的最低检出量约为5pg。应用该探针对从山东、江苏、四川等地采集的196只鸭病料。共1025份脏器的组织DNA进行检测，结果个体阳性率为33．2％，在各脏器中法氏囊、肝脏、脾脏的DuCV检出率较高，检出率分别为52．3％、49．2％、38．5％。同时对上述样品进行PCR检测，核酸探针检测与PCR检测两种方法的符合率为87．5％。研究结果表明，制备的DIG标记的核酸探针特异性强、敏感性高，适合对DuCV的诊断和流行病学调查。

摘要： 目前对鸭圆环病毒(DuCV)病原的研究主要集中在PCR检测及全基因组序列测定分析两个方面，最近检测DuCV抗体的EL1SA检测方法得以建立与应用，为进行DuCV的血清学调查提供了便利。PCR检测病原虽然具有灵敏度高的优点，但同时存在易呈现假阳性和假阴性的缺点。核酸探针杂交检测兼有灵敏度高、特异性高、稳定性和可靠性好的优点，近年来在病原微生物感染的检测中得到了广泛应用。本研究制备了DuCV的特异性核酸探针，并应用该探针对临床病料进行了检测。

摘要： 目的：建立快速检测食品中金黄色葡萄球菌的核酸探针检测法。rn 方法：通过使用吖啶酯标记的特异DNA探针方法检测金黄色葡萄球菌，并对其特异性及敏感性进行研究，比较该方法与传统国标法的检测效果。rn 结果：核酸探针检测方法特异性及敏感性强，检出纯培养菌落最低限为10 6cfu/ml，检测结果与国标法一致。rn 结论：核酸探针方法可用于食品中金黄色葡萄球菌的快速检测。

摘要： 试验旨在探讨利用纳米金标记寡核苷酸探针快速检测小反刍兽疫病毒核酸的方法。针对小反刍兽疫病毒N基因的高度保守区设计两条特异寡核苷酸探针，一条探针5`端修饰生物素，另一条探针3`端修饰巯基。巯基化的探针通过Au-S键连接到纳米金颗粒上。靶核酸两端分别与两条探针结合，形成“生物素化探针．靶核酸一纳米金探针”复合物，该复合物通过生物素-亲和素系统，固定在固相载体上，最后银染放大信号。通过肉眼观察法、光镜观察法、分光光度法分析银染灰度，从而间接测定靶核酸的量。初步检测PPRV核酸最低浓度达10 fhlol／L，所需时间约为1.5 h。该方法灵敏度高，操作简单，为临床检测小反刍兽疫病毒核酸提供实验数据和技术支持。

摘要： 利用RT-PCR方法扩增鸭坦布苏病毒的NS3基因406bp的特异性片段，回收并纯化PCR产物，用地高辛标记，制备核酸探针。特异性试验结果表明，该探针仅与鸭黄病毒的核酸特异性杂交，而与鸭瘟病毒、H9N2禽流感病毒、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、减蛋综合症病毒的核酸杂交均为阴性。敏感性试验表明，该探针对鸭黄病毒的RNA最低检出限量为100 pg／μL。对疑似黄病毒感染鸭的肝脏、肺脏、脾脏、输卵管、卵泡膜和泄殖腔棉拭子进行检测，以卵泡膜的检出率最高。该研究为鸭坦布苏病毒感染的诊断和流行病学调查提供了一种可靠的方法。

摘要： 鼻气管鸟杆菌(ORT)是一种高度多形性、无运动性、不形成芽胞的G-短杆菌，属rRNA第五超科，具有化学器官趋化性和嗜常温的特性，在分类上与里默氏菌属相似，至今尚未发现该菌有其它特殊结构或性质。建立一种有效、快速的诊断方法，是控制该病的有效措施之一。本研究建立的地高辛核酸探针杂交检测方法，是一种快速、简单、特异性强、敏感性高、结果易于判定的检测方法，并且探针保存时间长，重复性好。

摘要： 禽偏肺病毒(Avian metapneumovirus, aMPV)是副粘病毒科，肺炎病毒亚科，偏肺病毒属的成员。目前根据aMPV的核昔酸和氨基酸序列可以将其经典的分为A,B,C,D四个亚型。我国于98年首次分离到aMPV，之后便无报道。流行病学调查表明，目前我国鸡群中普遍存在aMPV感染，有的鸡群阳性感染率达100%，由此造成的直接和间接损失难以估计。因此加强该病的研究，对预防该病的发生，保护和促进养禽业的发展具有重要意义。本研究建立了B亚型aMPV地高辛探针检测方法，为该病病原的检测及流行病学调查提供依据。

摘要： 本文研究目的:从不同蜜蜂种类、品系的DNA基因组水平寻找其优良性状的分子标记,并对优良性状的分子标记进行测序和探针的制备,为了应用于全国800万群中优良蜂种的普查及筛选。研究方法:为分离纯化工蜂蜂蛹中基因组DNA,通过RAPD-PCR技术,制备基因组DNA多态性图谱寻找优良性状的分子标记,对分子标记进行核酸序列测定,使用地高辛将序列标记成核酸探针,最后利用基因组多态性图谱或探针可筛选出优良性状的蜂种。研究结果:(1)找到了采蜜高,产浆量多以及易感白垩病等3种分子标记,它们分别是K700bp、W316bp、P380bp;(2)对3种分子标记进行核酸测序;(3)将3种分子标记用地高辛标记成探针;(4)使用3种分子标记的DNA多态性图谱及核酸探针可以快速(48h)的应用于各蜂场进行优良蜂种的普查及筛选。

摘要： 本发明公开一种通过使构成双链核酸的单链核酸互补性地交联结合(或共价结合)而防止其受到如温度、pH、盐、离子强度(ionic strength)等的影响的稳定的双链核酸信号探针。此外，本发明公开一种能够在对靶分子进行检测时，首先利用上述稳定的双链核酸信号探针形成上述信号探针与靶分子的复合体，接下来再通过加热等方式从上述复合体分离出上述信号探针并对信号探针进行检测，从而检测出靶分子的方法。

摘要： 一种新的核苷三磷酸衍生物、一种核酸探针和一种能方便并高灵敏度地探测靶核酸的多标记核酸探针，以及一种制备该多标记核酸探针的方法，和一种使用该多标记核酸探针或该核酸探针探测靶核酸的方法。通过使用转谷氨酰胺酶(TGase)，并使用通过共价结合预先引入多个标记部分的多标记核酸探针，或者通过共价结合将多个标记部分引入已与靶核酸杂交的核酸探针中，从而可以方便和高灵敏度地探测靶核酸。

摘要： 本发明公开了一种用于固定核酸探针的点样液及其配制方法和核酸探针固定方法，该点样液含有1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺（EDC）和日落黄色素。使用本发明的点样液无需提前用盐酸、EDC处理尼龙膜，而是将该点样液与核酸探针溶液混合直接点到未经处理的尼龙膜上即完成核酸探针的固定。因此，使用本发明的点样液使得核酸探针的固定省时、低成本、易操作、可满足规模化生产要求。

摘要： 本发明属于分子生物学领域，涉及一种肽核酸探针、含有该肽核酸探针的组合物及其用途。具体而言，所述肽核酸探针带有可检测的标记，并且所述肽核酸探针的碱基序列为SEQ ID NO：1中或SEQ ID NO：2中连续的10-20个碱基。本发明还涉及含有该肽核酸探针的组合物、用于检测分枝杆菌的检测剂、用于检测分枝杆菌的试剂盒、一种原位杂交方法、一种检测分枝杆菌的方法、所述肽核酸探针在制备检测分枝杆菌的试剂中的用途、以及所述肽核酸探针在制备检测结核病的试剂中的用途。本发明的肽核酸探针信号强度高，并且特异性高，可以有效、快速地检测分枝杆菌和结核分枝杆菌复合菌群。

摘要： 本发明属于分子生物学领域，涉及一种核酸探针、含有该核酸探针的组合物及其用途。具体而言，涉及一种用于检测8号染色体数目的核酸探针；该核酸探针的核苷酸序列可以为SEQ ID NO：1或者其互补序列或者其具有序列同一性的变体。本发明还涉及用于检测8号染色体数目的检测剂、用于检测8号染色体数目的试剂盒、一种原位杂交方法、一种检测8号染色体数目的方法、所述核酸探针在制备检测8号染色体数目的试剂中的用途、以及所述核酸探针在制备检测8号染色体数目异常相关疾病的试剂或辅助试剂中的用途。本发明的核酸探针信号强度高，并且特异性高。

摘要： 一种新的核苷三磷酸衍生物、一种核酸探针和一种能方便并高灵敏度地探测靶核酸的多标记核酸探针，以及一种制备该多标记核酸探针的方法，和一种使用该多标记核酸探针或该核酸探针探测靶核酸的方法。通过使用转谷氨酰胺酶(TGase)，并使用通过共价结合预先引入多个标记部分的多标记核酸探针，或者通过共价结合将多个标记部分引入已与靶核酸杂交的核酸探针中，从而可以方便和高灵敏度地探测靶核酸。

摘要： 公开了核酸探针、将核酸固定到固体载体的方法、包含固定化核酸探针的固体载体和包括固体载体的测试装置。所述核酸探针包含末端锚链部分和捕获部分，其中所述末端锚链部分包含至少18个核苷酸的序列或与其具有至少90％的相似性的序列，所述序列由最多5个X型碱基的核苷酸的片段与(多个)胞嘧啶型碱基(C)的中间核苷酸和任选的一个鸟嘌呤型碱基(G)的核苷酸组成，其中每个X型碱基彼此独立地指定为胸腺嘧啶型碱基(T)或尿嘧啶型碱基(U)。使用UV光将所述核酸探针固定在固体载体上。还公开了一种测试系统，其包括具有至少一个超临界角荧光结构(SAF结构)的固体载体。

摘要： 本发明公开了一种用于固定核酸探针的点样液及其配制方法和核酸探针固定方法，该点样液含有1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺（EDC）和日落黄色素。使用本发明的点样液无需提前用盐酸、EDC处理尼龙膜，而是将该点样液与核酸探针溶液混合直接点到未经处理的尼龙膜上即完成核酸探针的固定。因此，使用本发明的点样液使得核酸探针的固定省时、低成本、易操作、可满足规模化生产要求。

摘要： 本发明涉及将锁核酸探针应用于肉制品中鸭源性成分的快速鉴别。建立的锁核酸探针荧光定量PCR方法具有快速、敏感、特异等优点，因采用样品Ct值与纯鸭肉Ct值的绝对差值作为肉制品中鸭肉掺假的判定标准，解决了肉污染引起的掺假误判和非特异性反应引起的假阳性问题。适应于肉制品中鸭源性成分的快速检测。包括引物和锁核酸探针序列的设计。上游引物序列为：5’-ACCTTCCCGCACCCTCTAAT-3’；下游引物序列为：5’GGCAGATGGCGAGCAGAGAT-3’；锁核酸探针序列为：5’-CY5-ATCTCYG+CYTGATGAAACTTCGG-BHQ-3’荧光PCR检测的反应体系为：20μL，包括10μLProbesMaster2×conc(包含有dNTP，Mg2+以及Taq酶等)，10μmol/L上述上下游引物F/R各0.8μL，10μmol/上述锁核酸探针P0.3μL，DNA模板1μL，超纯水补至20μL。反应参数：95°C8min；95°C，8s，58°C，25s（采集荧光信号），35～40循环。

摘要： 马源性成分锁核酸荧光定量PCR检测方法及其引物和锁核酸探针。本发明涉及将锁核酸探针技术应用于马源性成分的快速鉴别，建立的锁核酸荧光定量PCR方法具有快速、敏感、特异等优点，适应于肉制品中掺假马源性成分的快速检测。本发明包括引物和锁核酸序列的设计及锁核酸荧光定量PCR方法的建立。上游引物序列为：5’-CCCACTATCAGGATTCATACCC-3’；下游引物序列为：5’-AGTGAGGTGGAATAGGTTAGTCG-3’；锁核酸探针序列为：5’-FAM-ACACCAAAAATAGCAGCATCATCCTCC-BHQ1-3’锁核酸荧光定量PCR检测方法的反应体系为：20μL，包括10μLProbesMaster2×conc(包含有dNTP，Mg2+以及Taq酶等)，10μmol/L上述上下游引物F/R各0.4μL，10μmol/上述锁核酸探针P0.3μL，DNA模板1μL，超纯水补至20μL。反应参数：95°C8min；95°C，10s，58°C，30s（收集荧光信号），35～40个循环。