舌状蜈蚣藻提取物在制备改善记忆功能药品或保健食品中应用

摘要

本发明涉及一种舌状蜈蚣藻提取物在制备改善记忆功能药品或保健食品中的应用。将舌状蜈蚣藻通过稀酸浸泡处理，热水提取、固液分离、浓缩、喷雾干燥等步骤得到固体粉末。舌状蜈蚣藻提取物具有抑制乙酰胆碱酯酶活性和提高乙酰胆碱转移酶活性的作用，提高中枢神经系统中乙酰胆碱的含量，改善记忆功能。

说明书

技术领域

本发明属于海洋生物资源综合开发利用技术领域，具体涉及蜈蚣 藻提取物的制备方法及其在改善学习记忆功能药品或保健食品方面 的应用。

背景技术

随着生活条件的改善和科技的发展，人们对改善记忆功能和防治 痴呆的保健食品的需求越来越旺盛。经查询，在我国规定的27类保 健食品中，2003年12月12日之后经国家食品药品监督管理局审批 的具有辅助改善记忆功能的保健食品有90种，在国产5293种保健食 品中所占比例很小，这类产品十分具有开发前景。

研究认为，中枢胆碱能系统与学习记忆关系密切，乙酰胆碱 (acetylcholine，Ach)是促进学习记忆的神经递质，M胆碱能突触为 记忆的基础。ACh是中枢胆碱能系统中重要的神经递质之一，其主 要功能是维持意识的清醒，促进学习和记忆的改善。ACh是由胆碱、 乙酰辅酶A等在胆碱乙酰转移酶(choline.acety.transfertase，ChAT)的 催化下合成，由A乙酰胆碱酯酶(ChE)分解，其活力变化可间接反 映脑内Ach的代谢情况。

具有增强学习记忆功能的化学药品有乙酰胆碱酯酶抑制剂他克 林，吡拉西坦、尼莫地平等，长期服用具有一定的毒副作用。因此， 开发有效成分源于食品和药食同源中药的保健食品，辅助化学药品使 用可减少药物剂量，降低毒副作用；单独服用可用于轻症患者，可长 期服用。

广阔的海洋占地球面积的70％以上，蕴藏着丰富的生物资源。 随着陆地生态资源的匮乏，天然药物开发的持续发展，对海洋资源开 发利用的呼声日益高涨。海藻作为海洋生物资源的重要组成部分，大 量文献表明很多海藻成分具有良好的抗肿瘤、抗病毒、抗真菌、抗细 菌、免疫增强或抑制、抗氧化、防治脑心血管疾病、抑制某些靶酶等 生物活性。

舌状蜈蚣藻(Grateloupia livida(Harv).Yamada)是红藻门、真红 藻纲，隐丝藻目、海膜科、蜈蚣藻属的一种海水藻类植物，主要分布 于海南和广东沿海。在潮汕地区，作为一种药食两用的藻类植物，舌 状蜈蚣藻常被用于治疗咽喉肿痛、腹痛腹泻、湿热痢疾等疾病，具有 很高的药用保健价值。

尽管舌状蜈蚣藻的资源丰富，来源广泛，并且有一定的生物活性， 但目前国内外对它应用方面的研究还不多见，尤其是关于舌状蜈蚣藻 提取物改善学习记忆功能的作用尚属空白。本申请首次公开了舌状蜈 蚣藻提取物在改善学习记忆功能和抗痴呆的作用，希望为舌状蜈蚣藻 的应用开辟更广阔的空间。

发明内容

本发明的目的在于提供蜈蚣藻提取物在制备改善记忆功能的药 品或保健食品中的应用。为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

本发明对蜈蚣藻提取物的制备方法及其在改善记忆功能的作用 及机制进行了深入研究，首次发现舌状蜈蚣藻提取物具有改善记忆功 能的作用；

所述的蜈蚣藻提取物是从红藻门、真红藻纲，隐丝藻目、海膜科、 蜈蚣藻属舌状蜈蚣藻中提取的热水提取物，其制备方法为：将舌状蜈 蚣藻用稀酸浸泡10～60分钟，然后滤去稀酸溶液，并用清水洗至pH 为5～7，然后加入10～40倍量蒸馏水加热提取1～3小时，温度控制 在80～100℃，得提取液；将所述提取液经过滤或离心后，得到清液， 清液采用喷雾干燥得到蜈蚣藻提取物固体粉末，或，将清液减压浓缩， 浓缩液采用喷雾干燥得到蜈蚣藻提取物固体粉末。

所述蜈蚣藻提取物的制备方法中，稀酸浸泡时所用的稀酸为稀盐 酸或稀硫酸或稀醋酸，其pH范围为pH 1～4。

蜈蚣藻提取物通过提高乙酰胆碱转移酶活性，抑制乙酰胆碱酯酶 活性，从而提高中枢神经系统中乙酰胆碱的含量，改善记忆功能。

本发明具有以下优点：

1.使用效果好。实验结果表明蜈蚣藻提取物能够调控中枢神经 系统与学习记忆相关的关键神经递质乙酰胆碱的含量，通过抑制乙酰 胆碱酯酶活性和提高乙酰胆碱转移酶的活性，保持中枢神经系统乙酰 胆碱高含量，从而改善学习记忆功能，作用机制明确，使用效果好。

2.安全性高，可长期限服用。蜈蚣藻在我国潮汕地区被称为佛 祖菜，为食用海藻，本发明采用热水提取方法获得蜈蚣藻提取物，与 民间食用方法类似，具有较高的安全性。

具体实施方式

以下通过具体实施方式对本发明进行进一步说明。这里想要指出 的是，下面的具体实施方式仅用来说明本发明，本领域技术人员在理 解本发明精神的前提下，可以根据本技术领域的现有技术和公知知识 对本发明进行相应变换，这些技术方案均落入本发明的范围之内。

实施例1舌状蜈蚣藻提取物的制备

将100g干燥舌状蜈蚣藻，加10倍质量0.01mol/L的稀盐酸浸泡 处理30min，之后将稀酸液倒出，并用自来水清洗至清洗液为中性， 然后加入3L蒸馏水，在100℃提取3小时。300目筛绢过滤除去藻 渣，滤液用硅藻土助滤。将所得滤液浓缩，然后将该浓缩物喷雾干燥 得到28g的舌状蜈蚣藻提取物。

实施例2长叶蜈蚣藻(Grateloupia filicina)提取物的制备

将100g干燥长叶蜈蚣藻加10倍质量的0.01mol/L的稀醋酸浸泡 处理30min，之后将稀酸液倒出，并用自来水清洗至清洗液为中性， 然后加入3L蒸馏水，在100℃提取3小时。300目筛绢过滤除去藻 渣，滤液经4000rpm离心，收集上清液并浓缩，然后将该浓缩物喷 雾干燥得到32g的长叶蜈蚣藻提取物。

实施例3：舌状蜈蚣藻提取物的改善记忆功能

本发明以行为学和脑内乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱转移酶为指标， 对蜈蚣藻提取物的改善记忆功能进行了深入研究。

实验动物为3周龄雌性昆明种小鼠(二级)，体重为18～22g。 在试验前，小鼠自由获取饲料和水一周以适应实验室环境。

材料：实施例1中制备的舌状蜈蚣藻提取物以及实施例2中制备的 长叶蜈蚣藻提取物。实验中分别标记为GL(舌状蜈蚣藻提取物)和 GF(长叶蜈蚣藻提取物)。

实验方法按照卫生部《保健食品功能学评价程序和检验方法》中 “辅助改善记忆功能检验方法”进行。小鼠适应1周后，将小鼠分为水 迷宫、跳台和避暗3项试验，在试验前对动物进行初筛，将保留的小 鼠随机分为正常对照组、舌状蜈蚣藻提取物GL低剂量组、GL中剂量 组、GL高剂量组；长叶蜈蚣藻提取物GF低剂量组、GF中剂量组、GF 高剂量组；每组12只。蜈蚣藻提取物剂量设计，按每千克体重每日服 用剂量设为低、中、高剂量组，分别为0.2，0.4，0.8g，将蜈蚣藻提 取物分别溶于去离子水中，按0.1mL(每10g体重)给予灌胃，正常 对照组同时灌胃给予去离子水。连续给样30d，然后进行水迷宫和避 暗实验。行为学测试结束之后，小鼠断头取脑，于冰浴中迅速剥离海 马组织，以预冷的生理盐水制成10％组织匀浆。按照试剂盒说明书操 作，测定该组织的乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱转移酶活性。

数据统计：避暗实验中潜伏期和错误数、水迷宫实验中到达终点 所需时间和错误数的数据用方差分析，组间比较用t检验，结果以平 均值±标准差(M±SD)表示。

实验结果

1)蜈蚣藻提取物对小鼠水迷宫实验成绩的影响

连续给药30天后，进行水迷宫实验，结果如表1所示。结果表 明各实验组到达终点的动物数，与对照组相比较无显著差异。不同给 药组小鼠到达终点所需时间以及错误次数有明显差异。舌状蜈蚣藻提 取物个剂量组到达终点时间以及错误次数均明显优于正常对照组，而 长叶蜈蚣藻提取物各剂量组与正常组比较没有显著差异。水迷宫实验 结果显示舌状蜈蚣藻提取物能够显著提高小鼠水迷宫实验成绩，具有 显著改善小鼠记忆功能的作用，而长叶蜈蚣藻提取物没有提高记忆功 能的作用。

表1两种蜈蚣藻提取物给药30天对小鼠水迷宫实验成绩的影响

2)蜈蚣藻提取物对小鼠避暗实验成绩的影响

避暗实验结果如表2所示。结果表明各实验组到达终点的动物 数，与对照组相比较无显著差异。不同给药组小鼠潜伏期和错误次数 有明显差异。舌状蜈蚣藻提取物各剂量组到潜伏期明显延长，错误次 数明显降低，均明显优于正常对照组，而长叶蜈蚣藻提取物各剂量组 与正常组比较没有显著差异。避暗实验结果显示舌状蜈蚣藻提取物能 够显著提高小鼠潜伏期，降低错误次数，具有显著改善小鼠记忆功能 的作用，而长叶蜈蚣藻提取物没有提高记忆功能的作用。

表2两种蜈蚣藻提取物给药30天对小鼠避暗实验成绩的影响

3)海马乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱转移酶活性

乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱转移酶分别是乙酰胆碱的分解酶和合 成酶，两者共同调节脑内乙酰胆碱的含量。如表3所示，在海马组织 中，与正常组相比，舌状蜈蚣藻提取物的三个剂量组中，乙酰胆碱转 移酶活性升高，乙酰胆碱酯酶活性显著降低，而长叶蜈蚣藻提取物对 乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱转移酶作用不明显，说明舌状蜈蚣藻提取物 能够显著抑制海马内乙酰胆碱的分解，从而提高海马内乙酰胆碱的含 量。这可能是舌状蜈蚣藻改善小鼠记忆功能的机制。

表3两种蜈蚣藻提取物对小鼠乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱转移酶 活性的影响

结论：舌状蜈蚣藻提取物能够显著改善小鼠的学习记忆能力，降 低错误次数。提高乙酰胆碱转移酶活性，降低乙酰胆碱酯酶活性。具 有显著的改善记忆功能；而长叶蜈蚣藻提取物没有类似功能。

以上描述了本发明的具体实施例，然并非用以限定本发明，本领 域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精 神的改进和变化。