一种海洋地衣芽孢杆菌抗肿瘤蛋白的制备方法及其应用

摘要

一种海洋地衣芽孢杆菌抗肿瘤蛋白的制备方法，取干净、新鲜的海带并灭菌处理；对海带进行研磨，将研磨液均匀涂布于牛肉膏蛋白胨平板培养基上，在37℃的条件下恒温培养5~7天；挑取单菌落反复划线培养至纯菌株，得到海带内生地衣芽孢杆菌DNN6；以抑菌活性为指标优化菌株培养条件，优化的培养条件为菌株DNN6在pH9，蔗糖50g/L和蛋白胨10g/L的培养基中25℃发酵6天。8000r/min离心去除菌体，在上清液中加入硫酸铵，硫酸铵的饱和终浓度为95%，4℃静置过夜，过滤将沉淀用蒸馏水溶解后，用截留分子量为3600道尔顿的透析袋透析4天，取透析袋中物冷冻干燥，得海洋地衣芽孢杆菌抗肿瘤蛋白。本方法操作简单、成本低廉。