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提高HepGL肝癌细胞氨基甲酰磷酸合成酶表达的方法

摘要

本发明公开一种提高HepGL肝癌细胞氨基甲酰磷酸合成酶表达的方法,包括步骤:将HepGL肝癌细胞中提取的CPS1基因组DNA进行重亚硫酸盐处理;对根据处理后DNA扩增的CPS1启动子区域进行甲基化特异性基因扩增;将扩增出的甲基化序列进行测序;根据甲基化位点周围的碱基序列构建TALENs表达质粒及与甲基化位点同源的非甲基化同源质粒,其中,同源质粒中同源非甲基化序列为CG突变为CA的突变序列;将TALENs表达质粒和同源质粒转染至HepGL肝癌细胞中;筛选发生转染的HepGL肝癌细胞,并对其进行Q-PCR和蛋白质印迹法处理,以检测细胞中CPS1的mRNA及蛋白的表达量。本发明方法能够增强HepGL肝癌细胞代谢氨的能力。

著录项

  • 公开/公告号CN103710360A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2014-04-09

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 南方医科大学珠江医院;

    申请/专利号CN201310643626.X

  • 发明设计人 高毅;姜锡男;李阳;

    申请日2013-12-03

  • 分类号C12N15/52(20060101);C12N15/85(20060101);C12N5/10(20060101);

  • 代理机构11330 北京市立方律师事务所;

  • 代理人刘延喜;王增鑫

  • 地址 510282 广东省广州市海珠区工业大道中253号

  • 入库时间 2024-02-19 22:27:24

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2019-08-09

    发明专利申请公布后的驳回 IPC(主分类):C12N15/52 申请公布日:20140409 申请日:20131203

    发明专利申请公布后的驳回

  • 2014-05-07

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12N15/52 申请日:20131203

    实质审查的生效

  • 2014-04-09

    公开

    公开

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