一种稳定表达HBV耐药变异株细胞系及其用途

摘要

本发明属生物技术、微生物动物细胞系领域，涉及一种能够稳定表达HBV耐药变异株细胞系及其用途。本发明采用HBV真核表达质粒pREP-HBV-WT，定点诱变为阿德福韦耐药基因型A181V后插入切除RSV启动子的pREP10构建成HBV真核表达质粒pREP-HBV-A181V，转染HepG2细胞后通过潮霉素筛选，建立耐药HBV细胞克隆株HepG2.HS181V。该细胞株的保藏编号：CGMCC No.5829，分类命名：人肝癌细胞株。该耐药HBV细胞克隆株能持续表达HBsAg及HBeAg，胞内有HBV复制，并可以产生感染性HBV颗粒。该细胞系HepG2.HS181V表达HBsAg及HBeAg明显高于Hep2.2.15，细胞上清HBV颗粒水平低于HepG2.2.15。能用于筛选抗药物、研究HBV生物学特点及其与细胞间相互作用的HBV细胞模型的建立。