LAM耐药后ADV序贯治疗再耐药HBV变异株的动态变化

摘要

目的:观察阿德福韦酯(ADV)单药序贯治疗拉米夫定(LAM)耐药慢性乙型肝炎(CHB)出现再耐药患者HBV变异株的动态变化.方法:28例初始LAM治疗的CHB患者,出现LAM耐药后换用ADV单药序贯治疗再次出现不充分病毒学应答或病毒学突破.采用实时荧光定量PCR检测DNA,分析HBV DNA动态变化;采用直接PCR产物测序法检测耐药变异,分析变异模式变化.对其中2例患者系列血清进行基因克隆分析其HBV耐药株动态变化.结果:28例入选患者HBVDNA载量随耐药变异株的消长而波动:基线为(7.65±1.04)Log10 copies/mL,LAM疗程中最低值中位数为3.68Log10 copies/mL;出现病毒学突破或/和耐药变异时为(6.87±1.16)Log10 copies/mL,患者换用ADV后最低值中位数为3.78Log10 copies/mL;患者出现耐药变异模式改变或再次病毒学突破时为(6.04±0.93)Log10 copies/mL.治疗基线及两次病毒突破3个时点HBV DNA载量均数逐渐下降,且两两之间差异均有统计学意义.28例患者LAM治疗后24例发生rtM204I/V伴或不伴rtL180M等变异,4例无耐药变异;换用ADV单药序贯治疗出现病毒学突破后,进行测序检测耐药发现:LAM耐药变异13例(包括3例多重耐药),ADV耐药变异11例(包括3例多重耐药),无耐药变异7例.其中11例ADV耐药患者:rtA181V变异6例、rtA181T变异3例、rtN236T变异和rtA181V+rtN236T联合变异各1例.对2例患者血清TA克隆发现ADV耐药准种出现和LAM耐药准种消失的过程,同时发现对ADV耐药的rtI233M变异和对替诺福韦耐药的rtA194T变异.结论:ADV单药序贯治疗LAM耐药CHB出现再耐药患者HBV变异株动态变化存在5种形式,且克隆分析可观察耐药株动态变化过程和发现预存的耐药准种.