利用CRISPR/Cas9技术对葡萄ZEP基因定点编辑方法

摘要

利用CRISPR/Cas9技术对葡萄ZEP基因定点编辑方法。本发明利用CRISPR/Cas9技术，针对葡萄ZEP基因，通过筛选、设计sgRNA，进一步构建重组质粒，以含有该重组质粒的农杆菌侵染葡萄无菌苗子叶胚，筛选后获得突变的转基因葡萄植株。本发明精准定位选择葡萄ZEP基因的第一个外显子上的序列作为靶位点序列，该段序列能够成功被Cas9识别，以该靶位点序列为基础设计sgRNA，靶位点序列可被准确敲除，脱靶效率低，实现对葡萄ZEP基因进行定点编辑，对葡萄育种具有重要作用。