CRISPR/Cas9によるゲノム編集技術の進展と作物への応用発展し続けるCRISPR/Cas9を用いたゲノム編集技術

摘要

ゲノム編集技術の進展は目覚ましく，人工制限酵素を 用いて標的遺伝子を破壊することは多くの生物種で一般 的な技術となりつつある.そこで現在は標的遺伝子を狙 いどおりに改変することが技術開発の目標となってい る.現在最も汎用されている人工制限酵素ツールはCRISPR/Cas9 (Clustered Regularly Interspaced Palindromic Repeats/CRISPR-associated protein 9)システ ムである.このシステムにおいて中心的役割を担うのが Cas9タンノ《ク質で，通^ Streptococcus pyogenes (化膿 連鎖球菌）由来のCas9 (SpCas9)が用いられている. またSPCas9以外にもさまざまな細菌由来のCas9や Cas9類似のRNA依存性DNAェンドヌクレアーゼCpfl (CRI^PR from Prevotella and Francisella1)も禾U用さ れ始めている.Cas9, Cpflなどをゲノム編集に用いる際 の課題として，PAM (Protospacer Adjacent Motif)と 呼ばれる特定の塩基配列に隣接して標的配列を設定しな ければならないため，標的配列の選択には制限があるこ と，オフターゲット活性（本来の標的以外の配列を切断 すること）があることが挙げられる.これらの課題を解 決する技術として，PAMによる標的配列制限を緩和す るCas9，オフターゲット活性を低下させたCas9など， 改良型Cas9が次々と開発されている.さらに，CRIS-PR/Cas9を用いた標的配列における塩基置換技術も開 発されている.