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CRISPR/Cas9ゲノム編集を応用したェピゲノム操作法の開発

机译:利用CRISPR / Cas9基因组编辑的表观基因组操作方法的发展。

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摘要

ゲノム編集とはゲノムの特定部位の配列を削除した り、あるいは特定部位に任意のゲノム配列を挿入、置 換したりする新しい遺伝子改変技術である。1996年 にZFNが、2010年にTALEが開発されたが、これ らはDNA配列を認識する結合ドメインと制限酵素で あるFokIを結合させた人工制限酵素であり、ターゲッ ト配列ごとにこれらを合成する必要があるため、作成 に非常な労力と時間がかかった。ところが2012年 にCRISPR/Cas9システムが登場すると、簡便性ゆ えに急速にその利用が広まった。CRISPR/Cas9シス テムはターゲット配列を含む短いRNA(sgRNA)と Cas9というバクテリァ由来のDNA 二本鎖切断酵素 よりなる。この酵素はsgRNAに含まれるターゲット 配列依存的にDNAを切断する。つまり、DNA配列 ごとに異なるタンパク質を作製する必要がなく、また 標的配列のデザィンが簡便であるため、従来のゲノム 編集法と比較して迅速にゲノム編集ができるという特 徴がある。
机译:基因组编辑是一种新的基因修饰技术,可删除基因组特定位点的序列,或在特定位点插入或替换任意基因组序列。 ZFN于1996年开发,TALE于2010年开发。这些是人工限制性酶,将识别DNA序列的结合域与限制性酶FokI结合在一起,并为每个靶序列合成这些酶。创建它花费了很多精力和时间。然而,当CRISPR / Cas9系统于2012年推出时,由于其简单性,其使用迅速普及。 CRISPR / Cas9系统由包含靶序列的短RNA(sgRNA)和细菌衍生的称为Cas9的DNA双链断裂酶组成。该酶根据sgRNA中包含的靶序列切割DNA。换句话说,不必为每个DNA序列制备不同的蛋白质,并且靶序列的设计很简单,因此与常规的基因组编辑方法相比,可以更快地进行基因组编辑。

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