声明
摘要
1前言
1.1植物VQ基因家族
1.1.1 VQ蛋白特征
1.1.2 VQ蛋白的生物学功能
1.1.3 VQ蛋自在植物生长发育中的作用
1.1.4植物VQ蛋白响应生物胁迫
1.1.5植物VQ蛋白响应非生物胁迫
1.2.1 CRISPR/CaS9系统的作用机制
1.2.2 CRISPR/CaS9系统的开发利用
1.3目的及意义
2材料和方法
2.1技术路线
2.2实验材料
2.2.1植物材料
2.2.2菌株与质粒载体
2.2.3引物
2.2.4酶及主要生化试剂
2.2.5主要仪器与设备
2.3实验方法
2.3.1表达载体的构建
2.3.2基因枪介导水稻遗传转化
2.3.3水稻成熟胚转化流程
2.3.4亚细胞定位
2.4编辑植株的检测和鉴定
3结果与分析
3.1表达载体的构建
3.1.1亚细胞定位表达载体的构建
3.1.2 CRISPR/CaS9基因组编辑载体构建
3.2编辑植株的鉴定
3.2.2QsVQ30基因编辑植株鉴定
3.3CRISPR/CaS9体系脱靶分析
3.3.2QsVQ30基因的脱靶分析
3.4.2QsVQ30基因的遗传分析
3.5亚细胞定位
4讨论
4.1 VQ家族基因的研究
4.2 CRISPR/CaS9系统的应用
4.3基因组编辑效率的影响因素
4.4遗传和脱靶问题
4.5 OsVQ9和OsVQ30蛋白的亚细胞定位
5结论
参考文献
附录
致谢