利用CRISPR/Cas9编辑广东小耳花猪IGF2基因

摘要

IGF2(Insulin-like Growth Factor2)基因作为最复杂多样的生长因子之一,对猪胎儿发育以及出生后生长发育和肌肉生成起着非常重要的作用.研究表明IGF2基因内含子3的3072位点发生G＞A突变能显著提高猪的产肉量,并能降低背膘厚,通过基因组编辑技术对中国本地猪种的IGF2基因作精确的遗传修饰,对于提高本地猪种的瘦肉率具有重要的育种意义.本研究在广东小耳花猪的胎儿成纤维细胞(PEF)中检测了CRISPR/Cas9对IGF2基因的打靶效率,结果表明CRISPR/Cas9对IGF2基因的切割效率最高可达38％,并通过红绿荧光替代性报告载体(RGS reporter)技术将中靶细胞的比例提高至80％,这为构建IGF2基因敲除细胞系奠定了研究基础,为一下步通过体细胞克隆技术获得高瘦肉率的广东小耳花猪育种新材料提供了可能.