人内含子源性27nt-miRNA高表达质粒及其构建方法和应用

摘要

本发明提供了一种人内含子源性27nt‑miRNA高表达质粒，其序列为5’‑GAAGTCTAGACCTGCTGCAGGGGTGAG‑3’。首先根据人内含子源性27nt‑miRNA的核苷酸序列应用设计一对5’端相连方向相反的引物；再通过PCR技术扩增目的基因片段；依次进行双酶切、连接、转化、测序。本发明通过构建27nt‑miRNA高表达质粒，提高其在细胞或组织中的表达，研究其对心血管相关基因eNOS表达调控及其代谢产物NO等的影响，可为阐明其在心血管疾病中的功能和相关调控机制提供有用的工具，是基因治疗领域的创新，具有潜在的应用前景。