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A rapid and efficient method for the cloning of cosmid end-pieces

机译:一种快速高效的粘粒尾部克隆方法

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摘要

The construction of overlapping fragments of cloned DNA (contigs) is most efficient if end-pieces of the inserts can be rapidly isolated from the cloning vector. This may be accomplished by various procedures that are based on specific features of the vector. In the case of cosmids three methods are currently in use:i) the preparation of end-specific RNA probes generated via specific promoter sequences of the cloning vector (1,2);ii) PCR with one non-specific and one specific primer (3), and iii) inverted PCR(4).
机译:如果可以从克隆载体中快速分离出插入片段的末端片段,则克隆DNA(重叠群)重叠片段的构建将是最有效的。这可以通过基于载体的特定特征的各种程序来完成。对于粘粒,目前使用三种方法:i)制备通过克隆载体(1,2)的特定启动子序列产生的末端特异性RNA探针; ii)用一种非特异性和一种特异性引物进行PCR( 3)和iii)反向PCR(4)。

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