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糸状菌Trichod,a viride由来の抗腫瘍性酵素 しリシンalpha-ォキシダーゼの組換え発現,分子特性及び結晶構造の解析

机译:赖氨酸α-氧化酶的重组表达,分子特性和晶体结构,赖氨酸α-氧化酶是一种源自丝状真菌Trichod的抗肿瘤酶。

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摘要

L-リシンalpha-ォキシダーゼ(LysOX) (EC 1.4.3.14)は, 補酵素にFADを有するフラビン酵素で,しリシンの酸 化的脱ァミノ反応を触媒し,a-ケト£ -アミノカプロン 酸,過酸化水素,アンモニアを生産するレアミノ酸ォ キシダーゼ(LAO)の一種である一般に知られてい る蛇毒由来LAOは,基質特異性が低いがしリシンには ほとんど作用しない2''.し力、し,糸状菌7h'c/iOfifemM viride由来LysOX (Tv LysOX)は他のLAOとは違レゝ, レリシンに対して高い基質特異性(Km=40 muM)を持つ ている.さらに,本酵素は温度やpHに対しても高い 安定性を有しており,601:, 30分間の熱処理でも 90%以上の残存活性を示す.このため,食品工業分 野においてバイオセンサーとしてレリシンの微量定量 ゃネ金,屮,に室ffl化されている.また.Tv LysOXはマウスの腫瘍細胞に対して強い抗腫瘍性を示し,ヒト のガン細胞においても顕著な抗腫瘍性を持っているこ とがこれまでの研究によって明らかとなっている.著 者らはヒトの肺腫瘍細胞(RERF-LC-AI)と子宮頸がん 細胞(Hela)を用レ、,正常細胞のHUVECにTv LysOX の細胞毒性を検討した.腫瘍細胞のRERF-LC-AIと Helaは,3 mU/mlのLysOXの添加で4日後には多くの 細胞が死滅していた(図1A).—方正常細胞では,同 じ3 mU/mlのLysOXの添加でも80%の生存率であり, 腫瘍細胞に対する選択毒性を示した.
机译:L-赖氨酸α-氧化酶(LysOX)(EC 1.4.3.14)是一种黄素酶,具有FAD作为辅酶,催化赖氨酸的氧化脱氨基反应,以及α-酮基-氨基己酸的过氧化反应。众所周知,蛇纹石来源的LAO是一种产生氢和氨的酶(LAO),具有较低的底物特异性,但对赖氨酸的作用很小。与其他LAOs不同,来源于真菌7h'c / iOfifemM viride的LysOX(Tv LysOX)具有高的底物特异性(Km = 40μM),与其他LAOs不同。另外,对于601也具有高稳定性,即使在30分钟的热处理后也显示出90%以上的残留活性,因此在食品工业领域中,痕量的残留素被用作生物传感器。此外,Tv LysOX对小鼠肿瘤细胞显示出强大的抗肿瘤特性,并且在人类癌细胞中也具有显着的抗肿瘤特性。作者使用人肺肿瘤细胞(RERF-LC-AI)和宫颈癌细胞(Hela),并研究了电视LysOX对正常细胞HUVEC的细胞毒性。对于RERF-LC-AI和肿瘤细胞的Hela,在添加3 mU / ml LysOX(图1A)后4天后,许多细胞死亡(对于正常细胞,相同的3mU)。即使加入1ml LysOX,存活率仍为80%,显示出对肿瘤细胞的选择性毒性。

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