ХИМИЧЕСКАЯ МОДИФИКАЦИЯ СУЩЕСТВЕННЫХ ДЛЯ КАТАЛИЗА ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ГРУПП NAD-ЗАВИСИМОЙ ГИДРОГЕНАЗЫ ИЗ Ralstonia eurtopha H16

摘要

Проведена химическая модификация специфическими реагентами His- и Cys-аминокнсдогных остатков NAD-зависимой гилрогеназы из водород-окислнюших бактерий Ralstonia eurtopha H16. Показано, что неактпвпрованная форма гилрогеназы содержит остатки His. модификация которых приводит к падению как гидрогенлзноп. так я лиафоразнон каталитических активностей фермента. Активация гилрогеназы NADH в анаэробных условиях приводит к дополнительной модификации существенного только для гидрогеназной активности остатка (или остатков) His. Скорость паления диафоразной активности при этом не меняется. Модификация тноловых групп неактивированного фермента не влияет на активность гилрогеназы. Действие тиол-модифицмруюших агентов на активированную гид роге назу сопровождается инактивацией как днафсдозных. так и гллрогеьшных активностей. Степень модификации и изменение соответствующих каталитических активностей зависят от условии акт и вашии фермента. Эксперименты по модификации цисгеиновых и гистилиновыч остатков гилрогеназы указывают на значительные конфсрмашюнные изменения, проис.чоляшпе в белковой глобуле в результате активации фермента.