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アスパラガス根のフルクタン加水分解酵素(FEH)の四,五糖類に対する作用

机译:芦笋根果聚糖水解酶(FEH)对四糖和五糖的作用

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摘要

【目的】アスパラガス根のフルクタンが分解されて生成したフルクトース(Fru)は若茎の萌芽のエネルギーとして利用され る.我々はこれまでに,アスパラガスのフルクタン分解に関与するフルクタン加水分解酵素(FEH)はアスパラガスの主要な オリゴ糖である三糖類のネオケストース(Nk)に対してよく作用する酵素で既知の他植物のものとは異なる性質であること を報告した(H28年度本大会).本研究では四,五糖類に対する作用を調べることを目的とした.【方法】アスパラガスFEH はH28年度本大会で報告したものを用いた.基質には各種のィヌリンネオ型のフルクタン(1~F(1-β-D-f ructofuranosyl)_m~(-6)~G(1-β-D-fructofuranosyl)_n sucrose (Nk: m = 0, n =1;4c: m -1,n -1;5c: m - 2, n -1; 4b : m = 0, 2; 5b: m = 0, n = 3; 5d: m =1,n = 2)を用いた.基質の終濃度を10 mMとし,pH 5.0, 30℃で湯浴 し,反応生成物をHPAEGで分析した.生成したFru量から加水分解活性を算出した.酵素活性の単位は,1分間に1 μmol のフルクトースを生成する酵素量を1unitとした.【結果】本酵素のNkに対する加水分解活性を100%とすると4c, 5b, 5c に対して50-70%, 4b, 5dに対しては20%以下であった.アスパラガスのフルクタンに本酵素を経時的に作用させたところ, 各重合度のフルクタンの減少が観察されたが4b, 5dは残存していた.これらのことから本酵素はイヌリンネオ型のフルク タンの基本的な骨格である4b, 5dには作用しにくい酵素であることがわかった.
机译:[目的]芦笋根果聚糖分解产生的果糖(Fru)被用作发芽的能量,我们一直在研究果糖水解酶(FEH)参与芦笋果聚糖的分解。 )报道说,它是一种对新糖(Nk)有良好作用的酶,新糖是芦笋的主要寡糖,其三糖具有与其他已知植物不同的特性(H28,本次会议)。 [方法]芦笋FEH是2016财年在本次会议上报道的一种。芦笋FEH使用的是多种菊粉新型果聚糖(1到F( 1-β-Df呋喃呋喃糖基)_m〜(-6)〜G(1-β-D-呋喃呋喃糖基)_n蔗糖(Nk:m = 0,n = 1; 4c:m -1,n -1; 5c:m -2,n -1; 4b:m = 0,2; 5b:m = 0,n = 3; 5d:m = 1,n = 2),最终底物浓度为10mM,pH为5.0。在热水浴中于30℃下通过HPAEG分析反应产物,由产生的Fru的量计算水解活性,酶活性的单位是每分钟产生1μmol果糖的酶单位1。 [结果]假设该酶对Nk的水解活性为100%,对于4c,5b,5c为50-70%,对于4b,5d为20%以下。当该酶随时间作用时,观察到每个聚合度的果聚糖都减少了,但是保留了4b和5d,表明该酶是菊粉新型果聚糖的基本骨架。发现该酶难以作用于某些4b和5d。

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