双氢青蒿素对SLE小鼠巨噬细胞mRNAm6A甲基化的影响研究

摘要

cqvip:目的探讨双氢青蒿素对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠巨噬细胞mRNA N6-腺嘌呤(m^6A)甲基化修饰水平的影响。方法从SLE小鼠腹腔中获取腹腔巨噬细胞,在体外用双氢青蒿素刺激巨噬细胞。采用Dot Blot法检测巨噬细胞mRNA m^6A甲基化修饰水平,分别采用RT-PCR、Western blot法检测巨噬细胞m^6A甲基化转移酶(METTL3)、m^6A去甲基化修饰酶(ALKBH5和FTO)的mRNA和蛋白表达水平,m^6A-qRT-PCR法检测TLR7和TLR9 mRNA m^6A甲基化修饰水平。结果与空白对照比较,60μmol/L双氢青蒿素刺激来源SLE小鼠的巨噬细胞后,巨噬细胞mRNA的m^6A甲基化修饰水平显著降低(P<0.05);巨噬细胞的METTL3 mRNA和蛋白水平均明显上调(均P<0.05),而ALKBH5的mRNA和蛋白水平均明显下调(均P<0.05),且呈现双氢青蒿素浓度依赖;同时双氢青蒿素刺激后TLR7和TLR9 mRNA m^6A修饰水平降低(均P<0.05),进而抑制TLR7和TLR9的蛋白表达(均P<0.05)。结论双氢青蒿素可能通过调控巨噬细胞mRNA m^6A甲基化修饰水平抑制TLR7、TLR9蛋白表达的机制发挥治疗SLE的作用。