齐墩果酸通过AMPK介导的信号通路激活自噬改善脂毒性诱导的肝细胞损伤

摘要

目的 研究中药单体齐墩果酸(OLA)对棕榈酸(PA)诱导的Aml-12小鼠肝细胞脂毒性的保护作用,并揭示其潜在分子机制.方法 给予Aml-12小鼠肝细胞不同浓度OLA(10、20、40μmol/L)预处理2h后添加PA干预12h诱导肝细胞脂毒性.通过检测细胞乳酸脱氢酶释放量、Hoechst细胞核染色检测OLA对PA诱导脂毒性的保护作用;通过Western blot及siRNA干扰等技术检测OLA保护脂毒性的潜在分子机制.结果 PA干预以剂量依赖关系诱导肝细胞脂毒性.OLA干预显著改善PA诱导的肝细胞脂毒性(P<0.05),并呈明显的剂量依赖关系.机制研究表明激活自噬可显著抑制PA诱导的脂毒性,而抑制自噬加重PA诱导的脂毒性.OLA显著激活肝细胞自噬,且抑制自噬显著阻断OLA保护脂毒性的作用.此外,OLA显著激活自噬调控上游分子腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的磷酸化水平,采用化学抑制剂或siRNA干扰抑制AMPK可显著抑制OLA对脂毒性的保护作用.结论 OLA通过激活自噬显著改善PA诱导的肝细胞脂毒性,AMPK激活参与OLA对脂毒性的保护作用.OLA具有潜在防治非酒精性脂肪性肝病的作用.