小豆蔻明对H9c2细胞氧化损伤的保护作用

摘要

目的 探讨小豆蔻明(cardamonin,CAR)对H2O2诱导的H9c2大鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用及其初步作用机制.方法 提取山核桃叶中小豆蔻明,采用MTS(溴化噻唑蓝四氮唑)检测H2O2诱导氧化应激损伤的H9c2细胞存活率,Hoechst 33342染色观察其凋亡, Western blot技术检测p-AKT和AKT表达量,并用 PI3K/Akt 通路抑制剂LY294002 进行验证.结果 小豆蔻明在浓度为10μM时,能极显著提高H2O2诱导的H9c2细胞的存活率,心肌细胞存活率为(90.48±1.45)%;小豆蔻明能极显著的降低乳酸脱氢酶(LDH)活性和细胞丙二醛(MDA)含量,升高超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和过氧化氢酶(CAT)的活力;小豆蔻明组能减轻细胞核凝聚固缩的现象,减少细胞碎片;明显增加p-Akt的表达,但加入LY294002后,p-Akt蛋白的表达明显被抑制.结论 小豆蔻明对H2O2诱导的H9c2氧化应激具有一定的保护作用,其机制可能通过PI3K/Akt信号通路抑制H2O2诱导的H9c2细胞凋亡,与降低脂质过氧化效应,提高内源性抗氧化酶的活性有关.