H9c2

摘要： 背景:脓毒症心肌损伤与炎症反应及氧化应激损伤有关。既往研究表明川芎嗪具有抗氧化、维持钙稳态等多种功能。目的:探讨川芎嗪对脂多糖诱导的大鼠心肌细胞炎症反应及氧化应激作用的影响。方法:利用脂多糖(1μg/mL)诱导大鼠心肌细胞建立脓毒症心肌细胞炎性模型,通过不同浓度的川芎嗪(40,80,160μmol/L)干预治疗,24 h后进行检测。利用试剂盒检测川芎嗪对脂多糖诱导H9C2细胞乳酸脱氢酶以及活性氧释放的影响,荧光显微镜观察细胞凋亡情况,检测炎症因子白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6及Toll样受体4、MyD88的表达变化。结果与结论:(1)与对照组比较,模型组细胞中乳酸脱氢酶、活性氧表达水平显著上升(P<0.05),荧光显微镜下观察发现大量细胞被PI染色,且白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的表达水平显著升高(P<0.05);Toll样受体4、MyD88基因表达均显著上升(P<0.05);(2)与模型组比较,川芎嗪治疗组能够有效降低乳酸脱氢酶释放,降低活性氧水平,抑制PI染色H9C2细胞数目,降低白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的表达水平,抑制Toll样受体4、MyD88 mRNA及蛋白的表达(P<0.05);(3)提示川芎嗪可能通过抑制Toll样受体4/MyD88的表达降低细胞的炎症因子及氧化应激反应。

摘要： Objective:To investigate the effects of Qishen Yiqi dropping pills serum on KATP channel opening and PI3K/AKT signaling pathway of hypoxic/reoxygenated H9C2 cardiocytes.Methods:H9C2 cardiocytes cultured in vitro were randomly divided into five groups,A:H9C2 cell group B:H9C2 cells+H2O2 model group C:H9C2 cells+H2O2 model+Qishen Yiqi group D:H9C2 cells+H2O2 model+Qishen Yiqi+wort group E:H9C2 cells+H2O2 model+Qishenyiqi+5-HD group,the drug intervention is according to the corresponding conditions.CCK-8 method was used to detect the cell activity of each group;Western blot was used to detect the expression of AKT and P-Akt proteins in myocardial cells in each group.The current was recorded by the standard patch clamp whole cell recording method,and the current was collected and analyzed by Pclamp6.0 software.Results:CCK-8 test results showed that compared with group A,the activity of myocardial cells in group B was significantly decreased,and the difference was statistically significant(P0.05);The results of whole cell patch clamp experiment showed that the outward current of B was significantly increased compared with that of A,and the difference between groups was statistically significant(P<0.01);compared with group B,cardiomyocytes in group C further increased the outward current,and the difference between groups was statistically significant(P<0.01);compared with C,the current of D and E group were significantly decreased,with statistical significance between groups(P<0.01).Conclusion:QishenYiqi dropping pills can protect cardiomyocytes by activating p-Akt protein expression and KATP channel opening in H9C2 cardiomyocytes.

摘要： 目的优化2%氧浓度下的H_(9)C_(2)细胞缺氧/复氧模型。方肉基于以往方法,将处于对数生长期的H_(9)C_(2)心肌细胞置于2%氧浓度的移动式三气培养箱中4、6、8、10、12 h,再分别复氧4h。用CCK-8法测定心肌细胞存活率,用比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性。采用正交试验法优化细胞培养液条件(空白血清比例,含糖量),确定模型的最佳缺氧/复氧时间和培养条件。结果H_(9)C_(2)心肌细胞在缺氧4h/复氧4h、缺氧6h/复氧4h、缺氧8h/复氧4h、缺氧10h/复氧4h和缺氧12h/复氧4h时,心肌细胞存活率呈下降趋势;细胞上清液中LDH活性呈升高趋势。正交试验结果:20%血清含量;无糖培养基缺氧8 h、正常培养基复氧4 h为缺氧/复氧模型最优条件。结论优化的2%氧浓度下的H_(9)C_(2)细胞缺氧/复氧模型更趋稳定性、可控性、重复性。

摘要： 目的:探讨芪参益气滴丸含药血清对缺氧/复氧H9C2心肌细胞KATP通道开放及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:体外培养H9C2心肌细胞随机分为5组,即A:H9C2细胞组,B:H9C2细胞+H_(2)O_(2)模型组,C:H9C2细胞+H_(2)O_(2)模型+芪参益气组,D:H9C2细胞+H_(2)O_(2)模型+芪参益气+PI3K/AKT信号通路阻断剂(wort)组,E:H9C2细胞+H_(2)O_(2)模型+芪参益气+mitoKATP特异性阻断剂(5-HD)组,按照相应的条件进行给药干预。CCK-8法检测各组心肌细胞活性;Western blot法检测各组心肌细胞AKT、pAKT蛋白的表达。标准膜片钳全细胞记录方法记录电流,由Pclamp6.0软件采集和分析电流。结果:CCK-8检测结果显示:与A组相比,B组心肌细胞活性明显下降,差异具有统计学意义(P0.05)。全细胞膜片钳实验结果显示:与A组相比,B组外向电流显著增加,组间差异具有统计学意义(P<0.01);与B组相比,C组的心肌细胞进一步增加外向电流,组间差异具有统计学意义(P<0.01);与C组相比,D、E组电流明显降低,组间具有统计学意义(P<0.01)。结论:芪参益气滴丸通过激活缺氧/复氧H9C2心肌细胞中p-AKT蛋白的表达及KATP通道的开放,对心肌细胞起到保护作用。

摘要： 目的 研究lncRNA Gm4419对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞(H9C2)损伤的影响及潜在机制。方法 用10 mg/L LPS诱导心肌细胞H9C2细胞6 h,qRT-PCR检测细胞中lncRNA Gm4419和miR-204-5p的表达。在H9C2细胞中转染GM4419干扰物(si-GM4419)和miR-204-5p模拟物(miR-204-5p)干扰lncRNA Gm4419和过表达miR-204-5p,检测两者对LPS诱导的H9C2细胞损伤的影响,流式细胞术和Western印迹分别检测凋亡率及凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和酶切-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3的表达,检测LPS诱导后细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平;双荧光素酶报告系统验证lncRNA Gm4419与miR-204-5p的调控关系。结果 与con组相比,LPS可促进心肌细胞H9C2中lncRNA Gm4419表达(P<0.05),抑制miR-204-5p表达(P<0.05),提高H9C2细胞中Bax和酶切caspase-3蛋白及MDA的含量,减少Bcl-2蛋白及SOD、GSH-Px的含量,提高细胞凋亡率(P<0.05);干扰lncRNA Gm4419和过表达miR-204-5p均可减轻LPS诱导的H9C2细胞损伤并抑制细胞凋亡;lncRNA Gm4419靶向负调控miR-204-5p的表达;抑制miR-204-5p可逆转干扰lncRNA Gm4419对LPS诱导的H9C2细胞损伤的作用(P<0.05)。结论 lncRNA Gm4419通过靶向miR-204-5p调控LPS诱导的心肌细胞H9C2的损伤和凋亡。

摘要： 目的:探讨戊巴比妥钠诱导心力衰竭相关的H9c2大鼠心肌细胞损伤模型的制作并明确相关机制。方法:不同浓度不同造模时间戊巴比妥钠对H9c2心肌细胞进行干预,利用透射电镜检测细胞超微结构、三磷酸腺苷(ATP)、活性氧(ROS)、细胞凋亡、自噬等细胞改变。结果:模型组(戊巴比妥钠干预组)线粒体可见肿胀边缘不清、内膜破裂、嵴断裂等改变,并伴随自噬小体增多。模型组ATP含量显著减少(P0.05)。结论:戊巴比妥钠诱导的H9c2心肌细胞损伤模型符合心衰心肌细胞病理改变,明确戊巴比妥钠对心肌细胞的影响,可为体外心衰模型的研究提供基础理论。

摘要： 目的研究miR-322-5p对缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠心肌细胞H9c2损伤的影响及潜在的分子机制。方法对H9c2细胞进行H/R处理,qRT-PCR检测H/R诱导后H9c2细胞miR-322-5p和PRMT5 mRNA的表达,Western印迹测定PRMT5蛋白、凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达,测定H9c2细胞H/R后丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,流式细胞术测定细胞凋亡率,双荧光素酶报告系统验证miR-322-5p与PRMT5的调控关系。结果H9c2细胞经H/R处理后,细胞中PRMT5 mRNA和蛋白表达均显著升高,miR-322-5p表达显著降低(均P<0.05)。过表达miR-322-5p和敲减PRMT5均可显著降低H/R诱导的H9c2细胞凋亡率、Bax蛋白表达及MDA含量,而显著提高Bcl-2蛋白表达及SOD和GSH-Px活性(均P<0.05)。miR-322-5p靶向负调控PRMT5的表达。上调PRMT5逆转了过表达miR-322-5p对H9c2细胞氧化应激和凋亡的作用。结论miR-322-5p通过靶向下调PRMT5抑制H/R诱导的大鼠心肌细胞H9c2氧化损伤和凋亡。

摘要： 目的观察北五味子多糖(SCP)对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡及氧化应激损伤的影响及对微小RNA-212-3p(miR-212-3p)/10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)分子轴的调控机制。方法体外培养大鼠心肌细胞H9c2,建立H/R损伤模型,分别采用不同剂量SCP处理细胞;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用酶标法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-212-3p、PTEN表达量;应用双荧光素酶报告实验验证miR-212-3p、PTEN靶向关系。结果H/R处理后,细胞凋亡率升高(P<0.05),LDH、MDA含量与PTEN表达量升高(P<0.05),SOD含量与miR-212-3p表达量降低(P<0.05);SCP可降低细胞凋亡率与LDH、MDA含量及PTEN表达水平(P<0.05),提高SOD含量及miR-212-3p表达水平(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-212-3p可靶向结合PTEN;干扰miR-212-3p表达可减轻SCP对H/R诱导的心肌细胞凋亡及氧化应激损伤的作用。结论SCP可能通过促进miR-212-3p表达,抑制PTEN表达,从而抑制H/R诱导的心肌细胞凋亡,减轻氧化应激损伤。

摘要： 目的探讨振动运动对衰老心肌细胞线粒体的作用及可能的机制。方法选取H9C2心肌细胞系,通过D-半乳糖诱导心肌细胞衰老模型,分为对照组(CO)、衰老组(AG)、衰老+振动组(AV)、衰老+振动+AMPK抑制剂组(AV+C)。应用β半乳糖苷酶染色评价细胞衰老、油红O染色观察脂质沉积、免疫荧光染色和Western Blot检测H9C2细胞AMPK、p-AMPK、CPT1B和PGC1-α相关蛋白的表达,免疫荧光观察线粒体膜电位的变化。结果油红O染色显示D-半乳糖诱导后衰老H9C2细胞脂质沉积明显增加,CPT1B表达降低,给予振动运动后衰老H9C2细胞脂质沉积减少,CPT1B表达增加。与CO组相比,AG组PGC1-α降低,线粒体膜电位降低,与AG组相比,AV组PGC1-α的表达增加,线粒体膜电位增加。与CO组相比,AG组p-AMPK/AMPK降低,与AG组相比,AV组细胞p-AMPK/AMPK升高;给予AMPK抑制剂Compound C后,与AV组相比,AV+C组CPT1B表达降低、PGC1-α表达降低。结论振动运动通过激活AMPK改善心肌细胞的线粒体功能。

摘要： 目的 研究miR-24-3p对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响及潜在的分子机制.方法 qRT-PCR检测miR-24-3p和程序化细胞死亡因子(PDCD)5 RNA表达,Western印迹测定PDCD5蛋白、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Cleaved-caspase-3的表达,测定心肌细胞H9c2 H/R后乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,流式细胞术测定细胞凋亡率,双荧光素酶报告系统验证miR-24-3p与PDCD5的调控关系.结果 与对照组相比,H/R组心肌细胞H9c2中miR-24-3p表达量显著下降(P<0.05),PDCD5 mRNA和蛋白表达量显著上升(P<0.05);心肌细胞中LDH和MDA含量显著升高(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05);凋亡相关蛋白Bcl-2表达量显著下降(P<0.05),Bax和Cleaved-caspase-3表达量显著上升(P<0.05),细胞凋亡率显著上升(P<0.05).过表达miR-24-3p和抑制PDCD5表达均可减轻H/R对H9c2细胞的损伤,提高细胞抗氧化能力,抑制细胞凋亡;双荧光素酶报告系统结果显示,miR-24-3p靶向负调控PDCD5的表达;过表达PDCD5可逆转上调miR-24-3p对H9c2细胞H/R损伤的作用.结论 miR-24-3p通过靶向PDCD5减轻H/R对心肌细胞H9 c2的损伤、抑制细胞凋亡.

摘要： 失重飞行后和地面模拟失重的动物心肌发生萎缩，超微结构出现线粒体受损、脊断裂、基质密度下降和肌丝位置异常等变化。失重对于心电造成明显影响，主要表现为心律失常和心电传导发生改变。失重飞行对于心脏收缩功能有影响包括：心率增快，心脏每博量减少，左室舒张末期容积缩小。模拟微重力效应可抑制心肌细胞功能，导致心肌细胞收缩力减弱，搏动频率减慢，搏动节律异常。失重引起的这些生物学效应的机理尚不明了。线粒体是细胞进行生物氧化和能量转换的主要结构，线粒体结构和功能的完好对于保持心肌细胞的正常功能具有重要作用。本研究以大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞为材料，研究了模拟微重力效应对线粒体膜电位的影响。rn 本研究采用海藻酸钠微囊包裹大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞，进行三维立体培养，选用NASA旋转细胞培养系统(rotating cell culture system，RCCS)以15rpm／min模拟微重力效应，分别在24、48和72h后，将细胞固定，并将细胞从微球中释放出来，采用罗丹明123染色，流式细胞仪检测线粒体膜电位。采用MTT法测定线粒体琥珀酸脱氢酶活性，对于原代心肌细胞还研究了模拟微重力对于心肌细胞搏动影响。研究发现，心肌细胞系H9c2(2-1)能够在微球内形成三维细胞团，而原代心肌细胞能够形成具有搏动的细胞团。心肌细胞系H9c2细胞在海藻酸钠3D-模拟微重力效应培养系统中培养24、48和72h后，线粒体膜电位下降，线粒体琥珀酸脱氢酶活性下降，证明H9c2细胞在3D-模拟微重力效应培养系统中培养，细胞线粒体功能受损；模拟微重力效应培养原代乳鼠心肌细胞24、48和72h，观察到在微重力状态下培养24h，与地面三维对照相比，心肌搏动团块减少，搏动强度减弱，搏动频率不均一，地面三维对照平均在15次／min。继续在重力状态下培养48h，心肌细胞团停止搏动，而地面三维对照仍有大量搏动细胞团，与之对照的线粒体膜电位也在48h出现显著降低，说明模拟微重力效应影响心肌细胞搏动功能，心肌搏动能力减弱，或停搏。研究表明，采用微球包覆三维培养心肌细胞是研究模拟微重力效应对细胞的生物学影响是良好的模型；心肌线粒体功能受损可能是模拟微重力影响心肌细胞搏动的原因之一，该研究为进一步研究微重力效应影响心肌细胞功能的生物学机制提出了新的方向。

摘要： 失重飞行后和地面模拟失重的动物心肌发生萎缩，超微结构出现线粒体受损、脊断裂、基质密度下降和肌丝位置异常等变化。失重对于心电造成明显影响，主要表现为心律失常和心电传导发生改变。失重飞行对于心脏收缩功能有影响包括：心率增快，心脏每博量减少，左室舒张末期容积缩小。模拟微重力效应可抑制心肌细胞功能，导致心肌细胞收缩力减弱，搏动频率减慢，搏动节律异常。失重引起的这些生物学效应的机理尚不明了。线粒体是细胞进行生物氧化和能量转换的主要结构，线粒体结构和功能的完好对于保持心肌细胞的正常功能具有重要作用。本研究以大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞为材料，研究了模拟微重力效应对线粒体膜电位的影响。rn 本研究采用海藻酸钠微囊包裹大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞，进行三维立体培养，选用NASA旋转细胞培养系统(rotating cell culture system，RCCS)以15rpm／min模拟微重力效应，分别在24、48和72h后，将细胞固定，并将细胞从微球中释放出来，采用罗丹明123染色，流式细胞仪检测线粒体膜电位。采用MTT法测定线粒体琥珀酸脱氢酶活性，对于原代心肌细胞还研究了模拟微重力对于心肌细胞搏动影响。研究发现，心肌细胞系H9c2(2-1)能够在微球内形成三维细胞团，而原代心肌细胞能够形成具有搏动的细胞团。心肌细胞系H9c2细胞在海藻酸钠3D-模拟微重力效应培养系统中培养24、48和72h后，线粒体膜电位下降，线粒体琥珀酸脱氢酶活性下降，证明H9c2细胞在3D-模拟微重力效应培养系统中培养，细胞线粒体功能受损；模拟微重力效应培养原代乳鼠心肌细胞24、48和72h，观察到在微重力状态下培养24h，与地面三维对照相比，心肌搏动团块减少，搏动强度减弱，搏动频率不均一，地面三维对照平均在15次／min。继续在重力状态下培养48h，心肌细胞团停止搏动，而地面三维对照仍有大量搏动细胞团，与之对照的线粒体膜电位也在48h出现显著降低，说明模拟微重力效应影响心肌细胞搏动功能，心肌搏动能力减弱，或停搏。研究表明，采用微球包覆三维培养心肌细胞是研究模拟微重力效应对细胞的生物学影响是良好的模型；心肌线粒体功能受损可能是模拟微重力影响心肌细胞搏动的原因之一，该研究为进一步研究微重力效应影响心肌细胞功能的生物学机制提出了新的方向。

摘要： 失重飞行后和地面模拟失重的动物心肌发生萎缩，超微结构出现线粒体受损、脊断裂、基质密度下降和肌丝位置异常等变化。失重对于心电造成明显影响，主要表现为心律失常和心电传导发生改变。失重飞行对于心脏收缩功能有影响包括：心率增快，心脏每博量减少，左室舒张末期容积缩小。模拟微重力效应可抑制心肌细胞功能，导致心肌细胞收缩力减弱，搏动频率减慢，搏动节律异常。失重引起的这些生物学效应的机理尚不明了。线粒体是细胞进行生物氧化和能量转换的主要结构，线粒体结构和功能的完好对于保持心肌细胞的正常功能具有重要作用。本研究以大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞为材料，研究了模拟微重力效应对线粒体膜电位的影响。rn 本研究采用海藻酸钠微囊包裹大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞，进行三维立体培养，选用NASA旋转细胞培养系统(rotating cell culture system，RCCS)以15rpm／min模拟微重力效应，分别在24、48和72h后，将细胞固定，并将细胞从微球中释放出来，采用罗丹明123染色，流式细胞仪检测线粒体膜电位。采用MTT法测定线粒体琥珀酸脱氢酶活性，对于原代心肌细胞还研究了模拟微重力对于心肌细胞搏动影响。研究发现，心肌细胞系H9c2(2-1)能够在微球内形成三维细胞团，而原代心肌细胞能够形成具有搏动的细胞团。心肌细胞系H9c2细胞在海藻酸钠3D-模拟微重力效应培养系统中培养24、48和72h后，线粒体膜电位下降，线粒体琥珀酸脱氢酶活性下降，证明H9c2细胞在3D-模拟微重力效应培养系统中培养，细胞线粒体功能受损；模拟微重力效应培养原代乳鼠心肌细胞24、48和72h，观察到在微重力状态下培养24h，与地面三维对照相比，心肌搏动团块减少，搏动强度减弱，搏动频率不均一，地面三维对照平均在15次／min。继续在重力状态下培养48h，心肌细胞团停止搏动，而地面三维对照仍有大量搏动细胞团，与之对照的线粒体膜电位也在48h出现显著降低，说明模拟微重力效应影响心肌细胞搏动功能，心肌搏动能力减弱，或停搏。研究表明，采用微球包覆三维培养心肌细胞是研究模拟微重力效应对细胞的生物学影响是良好的模型；心肌线粒体功能受损可能是模拟微重力影响心肌细胞搏动的原因之一，该研究为进一步研究微重力效应影响心肌细胞功能的生物学机制提出了新的方向。

摘要： 失重飞行后和地面模拟失重的动物心肌发生萎缩，超微结构出现线粒体受损、脊断裂、基质密度下降和肌丝位置异常等变化。失重对于心电造成明显影响，主要表现为心律失常和心电传导发生改变。失重飞行对于心脏收缩功能有影响包括：心率增快，心脏每博量减少，左室舒张末期容积缩小。模拟微重力效应可抑制心肌细胞功能，导致心肌细胞收缩力减弱，搏动频率减慢，搏动节律异常。失重引起的这些生物学效应的机理尚不明了。线粒体是细胞进行生物氧化和能量转换的主要结构，线粒体结构和功能的完好对于保持心肌细胞的正常功能具有重要作用。本研究以大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞为材料，研究了模拟微重力效应对线粒体膜电位的影响。rn 本研究采用海藻酸钠微囊包裹大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞，进行三维立体培养，选用NASA旋转细胞培养系统(rotating cell culture system，RCCS)以15rpm／min模拟微重力效应，分别在24、48和72h后，将细胞固定，并将细胞从微球中释放出来，采用罗丹明123染色，流式细胞仪检测线粒体膜电位。采用MTT法测定线粒体琥珀酸脱氢酶活性，对于原代心肌细胞还研究了模拟微重力对于心肌细胞搏动影响。研究发现，心肌细胞系H9c2(2-1)能够在微球内形成三维细胞团，而原代心肌细胞能够形成具有搏动的细胞团。心肌细胞系H9c2细胞在海藻酸钠3D-模拟微重力效应培养系统中培养24、48和72h后，线粒体膜电位下降，线粒体琥珀酸脱氢酶活性下降，证明H9c2细胞在3D-模拟微重力效应培养系统中培养，细胞线粒体功能受损；模拟微重力效应培养原代乳鼠心肌细胞24、48和72h，观察到在微重力状态下培养24h，与地面三维对照相比，心肌搏动团块减少，搏动强度减弱，搏动频率不均一，地面三维对照平均在15次／min。继续在重力状态下培养48h，心肌细胞团停止搏动，而地面三维对照仍有大量搏动细胞团，与之对照的线粒体膜电位也在48h出现显著降低，说明模拟微重力效应影响心肌细胞搏动功能，心肌搏动能力减弱，或停搏。研究表明，采用微球包覆三维培养心肌细胞是研究模拟微重力效应对细胞的生物学影响是良好的模型；心肌线粒体功能受损可能是模拟微重力影响心肌细胞搏动的原因之一，该研究为进一步研究微重力效应影响心肌细胞功能的生物学机制提出了新的方向。

摘要： 失重飞行后和地面模拟失重的动物心肌发生萎缩，超微结构出现线粒体受损、脊断裂、基质密度下降和肌丝位置异常等变化。失重对于心电造成明显影响，主要表现为心律失常和心电传导发生改变。失重飞行对于心脏收缩功能有影响包括：心率增快，心脏每博量减少，左室舒张末期容积缩小。模拟微重力效应可抑制心肌细胞功能，导致心肌细胞收缩力减弱，搏动频率减慢，搏动节律异常。失重引起的这些生物学效应的机理尚不明了。线粒体是细胞进行生物氧化和能量转换的主要结构，线粒体结构和功能的完好对于保持心肌细胞的正常功能具有重要作用。本研究以大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞为材料，研究了模拟微重力效应对线粒体膜电位的影响。rn 本研究采用海藻酸钠微囊包裹大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞，进行三维立体培养，选用NASA旋转细胞培养系统(rotating cell culture system，RCCS)以15rpm／min模拟微重力效应，分别在24、48和72h后，将细胞固定，并将细胞从微球中释放出来，采用罗丹明123染色，流式细胞仪检测线粒体膜电位。采用MTT法测定线粒体琥珀酸脱氢酶活性，对于原代心肌细胞还研究了模拟微重力对于心肌细胞搏动影响。研究发现，心肌细胞系H9c2(2-1)能够在微球内形成三维细胞团，而原代心肌细胞能够形成具有搏动的细胞团。心肌细胞系H9c2细胞在海藻酸钠3D-模拟微重力效应培养系统中培养24、48和72h后，线粒体膜电位下降，线粒体琥珀酸脱氢酶活性下降，证明H9c2细胞在3D-模拟微重力效应培养系统中培养，细胞线粒体功能受损；模拟微重力效应培养原代乳鼠心肌细胞24、48和72h，观察到在微重力状态下培养24h，与地面三维对照相比，心肌搏动团块减少，搏动强度减弱，搏动频率不均一，地面三维对照平均在15次／min。继续在重力状态下培养48h，心肌细胞团停止搏动，而地面三维对照仍有大量搏动细胞团，与之对照的线粒体膜电位也在48h出现显著降低，说明模拟微重力效应影响心肌细胞搏动功能，心肌搏动能力减弱，或停搏。研究表明，采用微球包覆三维培养心肌细胞是研究模拟微重力效应对细胞的生物学影响是良好的模型；心肌线粒体功能受损可能是模拟微重力影响心肌细胞搏动的原因之一，该研究为进一步研究微重力效应影响心肌细胞功能的生物学机制提出了新的方向。

摘要： 失重飞行后和地面模拟失重的动物心肌发生萎缩，超微结构出现线粒体受损、脊断裂、基质密度下降和肌丝位置异常等变化。失重对于心电造成明显影响，主要表现为心律失常和心电传导发生改变。失重飞行对于心脏收缩功能有影响包括：心率增快，心脏每博量减少，左室舒张末期容积缩小。模拟微重力效应可抑制心肌细胞功能，导致心肌细胞收缩力减弱，搏动频率减慢，搏动节律异常。失重引起的这些生物学效应的机理尚不明了。线粒体是细胞进行生物氧化和能量转换的主要结构，线粒体结构和功能的完好对于保持心肌细胞的正常功能具有重要作用。本研究以大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞为材料，研究了模拟微重力效应对线粒体膜电位的影响。rn 本研究采用海藻酸钠微囊包裹大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞，进行三维立体培养，选用NASA旋转细胞培养系统(rotating cell culture system，RCCS)以15rpm／min模拟微重力效应，分别在24、48和72h后，将细胞固定，并将细胞从微球中释放出来，采用罗丹明123染色，流式细胞仪检测线粒体膜电位。采用MTT法测定线粒体琥珀酸脱氢酶活性，对于原代心肌细胞还研究了模拟微重力对于心肌细胞搏动影响。研究发现，心肌细胞系H9c2(2-1)能够在微球内形成三维细胞团，而原代心肌细胞能够形成具有搏动的细胞团。心肌细胞系H9c2细胞在海藻酸钠3D-模拟微重力效应培养系统中培养24、48和72h后，线粒体膜电位下降，线粒体琥珀酸脱氢酶活性下降，证明H9c2细胞在3D-模拟微重力效应培养系统中培养，细胞线粒体功能受损；模拟微重力效应培养原代乳鼠心肌细胞24、48和72h，观察到在微重力状态下培养24h，与地面三维对照相比，心肌搏动团块减少，搏动强度减弱，搏动频率不均一，地面三维对照平均在15次／min。继续在重力状态下培养48h，心肌细胞团停止搏动，而地面三维对照仍有大量搏动细胞团，与之对照的线粒体膜电位也在48h出现显著降低，说明模拟微重力效应影响心肌细胞搏动功能，心肌搏动能力减弱，或停搏。研究表明，采用微球包覆三维培养心肌细胞是研究模拟微重力效应对细胞的生物学影响是良好的模型；心肌线粒体功能受损可能是模拟微重力影响心肌细胞搏动的原因之一，该研究为进一步研究微重力效应影响心肌细胞功能的生物学机制提出了新的方向。

摘要： 失重飞行后和地面模拟失重的动物心肌发生萎缩，超微结构出现线粒体受损、脊断裂、基质密度下降和肌丝位置异常等变化。失重对于心电造成明显影响，主要表现为心律失常和心电传导发生改变。失重飞行对于心脏收缩功能有影响包括：心率增快，心脏每博量减少，左室舒张末期容积缩小。模拟微重力效应可抑制心肌细胞功能，导致心肌细胞收缩力减弱，搏动频率减慢，搏动节律异常。失重引起的这些生物学效应的机理尚不明了。线粒体是细胞进行生物氧化和能量转换的主要结构，线粒体结构和功能的完好对于保持心肌细胞的正常功能具有重要作用。本研究以大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞为材料，研究了模拟微重力效应对线粒体膜电位的影响。rn 本研究采用海藻酸钠微囊包裹大鼠心肌细胞系H9c2(2-1)和原代大鼠心肌细胞，进行三维立体培养，选用NASA旋转细胞培养系统(rotating cell culture system，RCCS)以15rpm／min模拟微重力效应，分别在24、48和72h后，将细胞固定，并将细胞从微球中释放出来，采用罗丹明123染色，流式细胞仪检测线粒体膜电位。采用MTT法测定线粒体琥珀酸脱氢酶活性，对于原代心肌细胞还研究了模拟微重力对于心肌细胞搏动影响。研究发现，心肌细胞系H9c2(2-1)能够在微球内形成三维细胞团，而原代心肌细胞能够形成具有搏动的细胞团。心肌细胞系H9c2细胞在海藻酸钠3D-模拟微重力效应培养系统中培养24、48和72h后，线粒体膜电位下降，线粒体琥珀酸脱氢酶活性下降，证明H9c2细胞在3D-模拟微重力效应培养系统中培养，细胞线粒体功能受损；模拟微重力效应培养原代乳鼠心肌细胞24、48和72h，观察到在微重力状态下培养24h，与地面三维对照相比，心肌搏动团块减少，搏动强度减弱，搏动频率不均一，地面三维对照平均在15次／min。继续在重力状态下培养48h，心肌细胞团停止搏动，而地面三维对照仍有大量搏动细胞团，与之对照的线粒体膜电位也在48h出现显著降低，说明模拟微重力效应影响心肌细胞搏动功能，心肌搏动能力减弱，或停搏。研究表明，采用微球包覆三维培养心肌细胞是研究模拟微重力效应对细胞的生物学影响是良好的模型；心肌线粒体功能受损可能是模拟微重力影响心肌细胞搏动的原因之一，该研究为进一步研究微重力效应影响心肌细胞功能的生物学机制提出了新的方向。

摘要： 一种碳九馏份制环戊二烯及甲基环戊二烯生产废液的利用方法，包括：废液在催化剂的存在下进行聚合反应，反应温度70～150°C，反应压力0.3～2.0MPa，反应时间3～8小时，催化剂为复合催化剂，主催化剂为三氯化铝，助催化剂为C2～C4烷基的烷基苯，或BF

摘要： 一种碳九馏份制环戊二烯、甲基环戊二烯的生产废液利用方法，包括：废液在催化剂的存在下进行聚合反应，反应温度80～150°C，反应压力0.5～2.0MPa，反应时间3～8小时，催化剂为复合催化剂，主催化剂为三氟化硼乙醚络合物，助催化剂为乙苯或丙苯，主催化剂与助催化剂的重量比为1∶1～5，催化剂用量以反应物的量为基准并以主催化剂的量计，为1～3wt％；聚合反应产物碱洗至中性，静置分层取油相物料；油相物料减压蒸馏以脱除轻组分杂质，得石油树脂产品。本发明由该生产废液制得了附加值较高的石油树脂，化点达到110～130°C，可用作油漆、橡胶、粘合剂和油墨等多种产品的制造原料。

摘要： 本发明提供一种α,ω‑二氨基九乙二醇的制备方法，包括如下步骤：步骤S1，使三甘醇胺与三苯基氯甲烷发生取代反应，得到N‑三苯甲基‑三甘醇胺；步骤S2，使所述N‑三苯甲基‑三甘醇胺与三甘醇双对甲苯磺酸酯发生醚化反应，得到N,N’‑双三苯甲基‑九乙二醇二胺；步骤S3，使所述N,N’‑双三苯甲基‑九乙二醇二胺与氢气发生氢化反应，得到所述α,ω‑二氨基九乙二醇。根据本发明实施例的α,ω‑二氨基九乙二醇的制备方法，无需使用叠氮化钠这样的剧毒原料，所使用的所有原料其毒性都相对较低，且整个合成路线中不涉及极端的工艺条件，并且最终产物提纯也相对简单，总收率高，适于工业化生产。

摘要： 本发明涉及甲基环戊二烯二聚体制备领域，更具体地，本发明涉及一种从裂解碳九馏分中制备甲基环戊二烯二聚体的方法，所述从裂解碳九馏分中制备甲基环戊二烯二聚体的方法包括下面步骤：(1)裂解碳九馏分输入到精馏塔T1中，侧线采出物料和惰性溶剂经预加热器E1进入反应器R1中进行裂解；(2)步骤(1)裂解后的物料经冷凝器E2急冷进入精馏塔T2中进行精馏，塔顶得到气相的环戊二烯和甲基环戊二烯；(3)步骤(2)得到的塔顶物料输入精馏塔T3中，侧线采出液相甲基环戊二烯；(4)步骤(3)得到的侧线采出物料进入二聚反应釜R2中进行二聚反应；(5)步骤(4)得到的甲基环戊二烯二聚反应物进入T4精馏塔提纯，得到高纯度的甲基环戊二烯二聚体。

摘要： 本发明公开了一种三行星架九齿第二行星架二级行星轮系式RCM机构。RCM机构虚拟中心点的位置、工作空间大小等特性直接影响微创手术机械的工作性能。本发明转动电机使转动杆实现一个方向的转动；输入电机驱动中间传动轮系使得套筒实现一个方向的转动；手术刀电机驱动手术刀实现一个方向的转动，绳索电机控制嵌套在套筒中的手术刀实现一个方向上的移动。本发明在第三行星架做平移运动的前提下，通过非圆齿轮保证第三行星齿轮旋转中心的运动轨迹为圆弧段，准确实现手术刀绕虚拟中心点进行三个方向上的转动，并实现手术刀在过虚拟中心点的轴线上进行移动，从而在微创手术中准确定位手术位置点，且机构简单，齿轮啮合保证运动准确性。

摘要： 一种碳九馏份制环戊二烯及甲基环戊二烯生产废液的利用方法，包括：废液在催化剂的存在下进行聚合反应，反应温度70～150°C，反应压力0.3～2.0MPa，反应时间3～8小时，催化剂为复合催化剂，主催化剂为三氯化铝，助催化剂为C2～C4烷基的烷基苯，或BF

摘要： 一种碳九馏份制环戊二烯、甲基环戊二烯的生产废液利用方法，包括：废液在催化剂的存在下进行聚合反应，反应温度80～150°C，反应压力0.5～2.0MPa，反应时间3～8小时，催化剂为复合催化剂，主催化剂为三氟化硼乙醚络合物，助催化剂为C2～C4烷基的烷基苯，主催化剂与助催化剂的重量比为1∶1～5，催化剂用量以反应物的量为基准并以主催化剂的量计，为1～3wt％；聚合反应产物碱洗至中性，静置分层取油相物料；油相物料减压蒸馏以脱除轻组分杂质，得石油树脂产品。本发明由该生产废液制得了附加值较高的石油树脂，化点达到110～130°C，可用作油漆、橡胶、粘合剂和油墨等多种产品的制造原料。

摘要： 一种由碳九、碳十馏份制取双环戊二烯及甲基环戊二烯的方法，包括：原料进行裂解，裂解温度为160～230°C、压力为表压0～0.4MPa、物料的停留时间为1～5hr；裂解生成的气相物料进行精馏，塔顶温度为40～70°C、压力为表压0～0.4MPa，塔顶得到环戊二烯物料，精馏段温度为60～80°C处侧线得粗甲基环戊二烯物料；过程2得到的环戊二烯物料进行二聚反应得双环戊二烯，反应温度为45～130°C，压力为表压0～0.2MPa；过程2得到的粗甲基环戊二烯物料进行精馏，塔顶温度为40～56°C、塔釜温度为90～120°C、压力为表压0～0.2MPa，塔底获得精甲基环戊二烯产品，塔顶排出轻组分杂质。

摘要： 一种由碳九、碳十馏份制取环戊二烯及甲基环戊二烯的方法，包括：1)原料进行裂解，裂解温度为160～230°C、系统压力为表压0～0.3MPa、物料的停留时间为1～5hr；2)裂解生成的气相物料直接进行精馏，精馏塔顶温度为38～60°C、系统压力为表压0～0.3MPa、回流比为0～4，塔顶得到精环戊二烯产品，精馏段温度为60～80°C处侧线得到粗甲基环戊二烯物料，塔釜物料返回裂解系统；3)过程2得到的粗甲基环戊二烯物料进行精馏，精馏塔顶温度为40～55°C、塔釜温度为90～120°C、系统压力为表压0～0.2MPa、回流比为4～10，塔底获得精甲基环戊二烯产品，塔顶排出轻组分杂质。

摘要： 本实用新型公开了三行星架九齿第二行星架二级行星轮系式RCM机构。RCM机构虚拟中心点的位置、工作空间大小等特性直接影响微创手术机械的工作性能。本实用新型转动电机使转动杆实现一个方向的转动；输入电机驱动中间传动轮系使得套筒实现一个方向的转动；手术刀电机驱动手术刀实现一个方向的转动，绳索电机控制嵌套在套筒中的手术刀实现一个方向上的移动。本实用新型在第三行星架做平移运动的前提下，通过非圆齿轮保证第三行星齿轮旋转中心的运动轨迹为圆弧段，准确实现手术刀绕虚拟中心点进行三个方向上的转动，并实现手术刀在过虚拟中心点的轴线上进行移动，从而在微创手术中准确定位手术位置点，且机构简单，齿轮啮合保证运动准确性。