小豆蔻明保护精子体外氧化损伤的作用及其机制研究

摘要

目的：考察小豆蔻明(Cardamonin,CAR)对氧化损伤精子的保护作用,并探讨其可能的机制,以期寻找一种安全有效的治疗男性不育的药物.rn 方法：取健康男性精液样本,以LPS诱导氧化损伤,分组加入CAR或维生素C处理15h.倒置相差显微镜测定精子总活力和尾部低渗膨胀率;荧光显微镜观察精子顶体完整率和DNA损伤指数;流式细胞仪检测精子凋亡率;NBT比色法测定活性氧含量;TBA法测定丙二醛(MDA)含量;WST法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western-Blot法检测p38MAPK、p-p38MAPK蛋白的表达.rn 结果：在脂多糖诱导的氧化损伤中,CAR明显提高精子活力以及降低凋亡率和DFI(P＜0.01);并且CAR显著提高精子膜低渗彭胀率和顶体完整率(P＜0.01),其中高剂量组CAR的作用较强;CAR显著降低ROS含量和MDA含量,并且明显提高SOD活力(P＜0.05),其中高剂量组CAR的作用较强;CAR可剂量依赖性抑制LPS刺激引起的P38MAPK磷酸化(P＜0.05),并且CAR对p38MAPK总蛋白的表达无显著性影响;LPS组的p38MAPK磷酸化表达量以及ROS含量与正常对照组相比均显著升高(P＜0.05),并且p38MAPK的磷酸化表达量与ROS的含量呈正相关.rn 结论：CAR可提高SOD活力和降低ROS、MDA含量,保护精子氧化应激损伤;其机制可能与剂量依赖性抑制p38MAPK磷酸化有关.