Raptor介导小豆蔻明抑制SKOV3细胞增殖的作用机制研究

摘要

目的：明确Raptor(regulatory associated protein of mTOR)调控mTORC1(mammalian target of rapamycin complex1)通路活性的重要地位;探索Raptor在小豆蔻明(Cardamonin,CAR)下调mTORC1通路活性、抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖的作用机制.rn 方法：人卵巢癌SKOV3细胞株及经脂质体法转染Raptor siRNA的SKOV3,分别设立空白组、CAR组(5、20μM)、阳性对照药雷帕霉素(Rapamycin,RAP)组(0.1μM)及AZD8055(0.1μM)组.MTT法检测细胞增殖;聚合酶链式反应(PCR)观察转染效率与干扰效果;Western Blotting法检测mTOR、p-mTOR、Raptor、p-Raptor、PRAS40、p-PRAS40、S6K1、p-S6K1蛋白表达.rn 结果：CAR显著抑制mTOR、Raptor、PRAS40及S6K1的蛋白磷酸化,同时抑制Raptor总蛋白表达,均呈浓度依赖性(P＜0.05);Raptor siRNA的SKOV3细胞,其Raptor mRNA和蛋白表达降低;mTOR、Raptor、PRAS40、S6K1的磷酸化蛋白及Raptor的总蛋白表达在Raptor siRNA的SKOV3细胞显著低于SKOV3细胞;细胞经CAR处理后,mTOR、Raptor、PRAS40、S6K1的磷酸化蛋白及Raptor总蛋白表达进一步降低(P＜0.05);CAR显著抑制Raptor siRNA SKOV3细胞及SKOV3细胞增殖,前者更明显(P＜0.05).rn 结论：Raptor是mTORC1活性调控的关键蛋白,CAR抑制SKOV3卵巢癌细胞增殖与降低Raptor的表达量密切相关.