MS-SSCA法在检测基因异常甲基化中的应用

摘要

目的介绍一种简单、敏感的筛查多个标本、多个CG二核苷酸甲基化状况的方法。即甲基化敏感的单链构象分析法(methylation-sensitive, Single-strand Conformation Analysis,MS-SSCA)。方法单链DNA的胞嘧啶可被亚硫酸氢盐修饰转变成尿嘧啶，而5'甲基胞嘧啶仍保持不变。这种修饰处理可在甲基化和非甲基化基因组DNA间产生DNA序列差异，而这种DNA序列差异可通过PCR-SSCP法较为灵敏地筛查出。利用该原理检测乳腺癌细胞BRCA1基因启动子区13个CG二核苷酸甲基化状况。结果在癌细胞中发现两种异常甲基化，即高度甲基化及部分甲基化。结论 MS-SSCA法在基因甲基化检测中将有很大的应用潜能，为探讨肿瘤发生机制提供了新的分子分析方向。