过表达miRNA-495联合替莫唑胺对神经胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的 探讨过表达微小RNA(miRNA)-495联合替莫唑胺(TMZ)对神经胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 将miRNA-495类似物(miRNA-495 mimics)以及阴性对照序列(miRNA-495 NC)应用LipofectamineTM 2000转染至神经胶质瘤U251、A172细胞中,并设空白对照组.采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测转染后miRNA-495、高迁移率族核小体结合域5(HMGN5)mRNA的相对表达量;Western blot法检测HMGN5及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平;CCK-8检测神经胶质瘤细胞的增殖能力.miRNA-495 mimics和TMZ单独或联合作用于U251细胞后,应用CCK-8、流式细胞术检测神经胶质瘤细胞增殖及凋亡情况.结果 在神经胶质瘤U251、A172细胞中,与空白对照组和miRNA-495 NC组比较,miRNA-495 mimics组miR-495相对表达量升高,HMGN5 mRNA相对表达量及HMGN5、MMP-9蛋白表达量均降低;且细胞增殖能力明显减弱(P<0.05).在神经胶质瘤U251细胞中,与TMZ组和miRNA-495 mimics组比较,TMZ+miRNA-495 mimics组细胞增殖能力明显被抑制,细胞凋亡明显增加.结论 过表达miRNA-495与化疗药物TMZ联合应用可协同抑制神经胶质瘤细胞增殖、促进细胞凋亡;其机制可能是通过抑制HMGN5/MMP-9信号通路实现的.