Notch通路上调miR-223抑制FBXW7表达对结肠癌HCT116细胞生物学的影响

摘要

cqvip:目的探讨microRNAs(miRNAs)对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法经实时定量PCR和Western blot检测20例结肠癌组织及癌旁正常组织标本中FBXW7 mRNA和其蛋白水平。通过TargetScan工具预测、定量PCR和荧光素酶活性实验鉴定与FBXW7结合的miRNAs,瞬时转染miR-223和其对照miCtr、抑制剂(Inhibitor)入HCT116细胞后检测FBXW7 mRNA和蛋白水平,CCK-8和流式细胞术分别检测细胞活性和凋亡率。同时通过siRNA下调Notch3表达后,检测miR-223水平以及细胞凋亡率。结果结肠肿瘤组织中FBXW7 m RNA与蛋白含量低于癌旁组织(P<0.05),预测并证实miR-223与miR-25能够与FBXW7基因特异结合。HCT116细胞中瞬时转染miR-223后,FBXW7 mRNA水平和蛋白表达量下调(P<0.01),细胞活性增加(P<0.05),而细胞凋亡率降低(P<0.01)。下调Notch3通路后,miR-223表达水平下降(P<0.001),FBXW7 mRNA水平上升(P<0.01),细胞凋亡率下降(P<0.05)。结论 Notch通路上调miR-223水平,进而抑制FBXW7基因的表达,最终促进结肠癌细胞HCT116的增殖并抑制其凋亡。