rHPLC定量分析血浆Hcy方法的比较研究

摘要

目的:建立一种高效简单的血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度的定量分析法.方法:以N-乙酰半胱氨酸为内标,SBD-F为衍生剂,分别使用硼氢化钠和3-丁基膦为还原剂及磷酸盐和乙酸盐为流动相,应用反相高效液相色谱-荧光检测器(rHPLC-FD),在测定Hcy标准品的基础上,测定63例健康人血浆Hcy浓度.结果:所有色谱图均有较好分离效果.应用硼氢化钠为还原剂和磷酸盐为流动相的方法检测Hcy浓度,其最小检测限为1.0μmol/L,批间差异为4.48%,批内差异为4.20%,回收率为(98.62±5.05)%.测得健康成人血浆平均Hcy浓度为(10.11±1.91)μmol/L.同份样品用硼氢化钠还原比用3-丁基膦还原反应快,但色谱图杂峰多,用磷酸盐为流动相洗脱时间略长,但对色谱柱损害小.结论:本方法适用于临床实验室对Hcy的常规定量测定.3-丁基膦更适合为Hcy的还原剂,使用磷酸盐为流动相可延长色谱柱的使用寿命.