血浆代谢组同时定性定量分析方法研究

摘要

数据非依赖的质谱采集是近年来发展的一种新型多级质谱分析方法,只需一次进样便可同时快速获取所有母离子及其子离子信息.本研究以肺癌血浆样本为研究对象,采用数据非依赖的SWATH(sequential windowed acquisition of all theoretical fragment ions)采集技术,建立了液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时定性定量分析血浆代谢组.基于代谢物数据库识别比对,成功识别了93个代谢物,实现了代谢物的定性分析.对成功识别的代谢物建立定量分析方法并进行方法学考察.结果表明,其中90个代谢物的线性相关系数大于0.99,定量限在1.25～12000μg/L之间;其中有86个代谢物可以满足生物样本定量分析的要求,其连续4天的日内精密度和日间精密度均小于20％;在4℃下,96 h内的放置稳定性在0.62％～19.35％之间.该方法的覆盖率高,能同时快速准确地对肺癌血浆中癌症相关代谢物进行定性定量分析,也适用于其他生物样品,可以为定量代谢组学分析提供重要的方法学平台.