PAMAM-D对异种移植用外源基因转染猪精子细胞介导作用的研究

摘要

目的:探讨新型纳米材料聚酰胺-胺型树枝状聚合物PAMAM-D对异种移植用外源基因人衰变加速因子(hDAF)转染猪精子细胞的介导作用.方法:制备PAMAM-D/hDAF cDNA复合物,分为0.2、0.4、0.6、0.8和1.0μg组,每组eDNA再按照氮磷比10:1、20:1、40:1分别加入相应剂量PAMAM-D及不加PAMAM-D,对复合物进行酶切和电泳;将复合物与猪精子细胞共孵育后,原位杂交法检测hDAF对猪精子细胞的转染效率.结果:PAMAM-D能阻止PAMAM-D/DNA复合物中DNA的降解;PAMAM-D可以促进猪精子细胞对外源性DNA的摄取,其中0.4和0.6μg组的转染效率高于其他3组,0.4 μg线状质粒加入PAMAM-D(氮磷比20:1)转染率为(47.5±0.2)%,是不加PAMAM-D的167%.结论:以PAMAM-D为载体可以提高外源基因对猪精子细胞的转染效率,有助于外源基因与精子细胞的稳定结合.