溶藻弧菌外膜蛋白OmpU的克隆、表达条件优化及多克隆抗体制备

摘要

OmpU蛋白为溶藻弧菌主要外膜蛋白,具有很好的免疫原性,在疫苗上有很好的应用前景.本试验通过分子克隆获得OmpU蛋白的表达菌株,利用切胶纯化获得OmpU蛋白,免疫小鼠制备多克隆抗体,采用ELISA法检测抗体滴度为1∶3200倍,WestemBlotting法检测抗血清特异性较好.通过正交试验,获得OmpU菌株的最佳表达条件为:诱导时菌液OD600值1,加IPTG终浓度0.1mmol/L,诱导时闻8h,温度32℃;最佳培养条件为:葡萄糖浓度0.4％,转速230r/min,装液量50 mL.为OmpU工业发酵、蛋白功能与疫苗开发研究奠定基础.