淫羊藿苷对TRAIL诱导胶质母细胞瘤细胞凋亡的影响及其分子机制

摘要

目的 观察淫羊藿苷(ICA)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导胶质母细胞瘤(GBM)细胞凋亡的影响,并探讨其分子机制.方法 取GBM细胞U87(中度耐药)和U373(重度耐药),以不同浓度ICA、TRAIL处理,MTT法检测细胞活力确定ICA、TRAIL作用浓度分别为10μmol/L、50 ng/mL.将两种细胞各自分成对照组、TRAIL组、ICA组、TRAIL+ICA组,分别加DMSO、TRAIL、ICA、TRAIL+ICA处理48 h,采用流式细胞术测算细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞凋亡关键蛋白Caspase-3及其切割底物PARP,ELISA法测定细胞裂解物中Caspase-3活性.将两种细胞随机分为4组,阻断组和阻断处理组先予以Caspase抑制剂z-VAD-fmk预处理4 h后再分别加入DMSO、TRAIL+ICA,对照组和处理组不预处理分别加DMSO、TRAIL+ICA,处理48 h后采用流式细胞术测算细胞凋亡率.结果 与对照组、ICA组、TRAIL组比较,TRAIL+ICA组细胞凋亡率增高,细胞中Caspase-3、PARP蛋白表达量增加,细胞裂解物中Caspase-3活性增强(P均<0.05);对照组、ICA组、TRAIL组两两比较,差异均无统计学意义.处理组细胞凋亡率高于对照组、阻断组、阻断处理组(P均<0.05),对照组、阻断组、阻断处理组两两比较差异均无统计学意义.结论 ICA通过Caspase依赖性方式促进TRAIL诱导的GBM细胞凋亡.