维拉帕米对脓毒症大鼠心肌细胞自噬水平的影响

摘要

目的 观察钙通道阻滞剂维拉帕米对脓毒症大鼠心肌细胞自噬水平的影响.方法 将54只大鼠随机分为对照组、模型组、干预组,每组18只.模型组和干预组采用盲肠结扎穿孔术制作脓毒症模型,对照组取出盲肠不结扎穿孔仍放回腹腔.三组术后均给予生理盐水腹腔注射,干预组另给予盐酸维拉帕米注射液5 mg/kg腹腔注射.于术后6、12、24h各组分别处死6只大鼠,取心肌组织,采用HE染色法观察组织形态学变化;取心脏血,离心分离血清,酶联免疫吸附法测定肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB);Western blotting法、qRT-PCR法分别检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白和mRNA表达.结果 模型组、干预组心肌组织HE染色见心肌细胞排列紊乱、明显肥大;模型组、干预组CK-MB、cTnT较对照组升高;模型组LC3、Beclin-1表达高于对照组,且随时间延长逐渐增高,Bcl-2表达低于对照组,且随时间延长逐渐降低;干预组12、24 h时LC3表达低于模型组,6、12、24h时Beclin-1表达低于模型组,6、12、24h时BCL-2表达高于模型组(P均＜0.05).结论 脓毒症可有效激活心肌自噬,自噬水平在24h内呈上升趋势;维拉帕米干预可抑制自噬,保护心肌组织.