脐带间充质干细胞体外诱导分化为肝细胞样细胞的研究

摘要

目的 探讨人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)体外诱导分化为肝细胞的可行性和方法,观察分化后的细胞白细胞表面抗原表达的改变.方法 采用酶学法从脐带全层组织中分离UC-MSCs,采用改良的肝分化培养体系体外诱导UC-MSCs向肝细胞分化.诱导后2、4周,观察细胞形态,免疫荧光细胞化学染色法检测甲胎蛋白(AFP)、自蛋白(ALB);RT-PCR检测肝细胞标志性基因AFP、ALB和CK19 mRNA.EUSA法检测诱导后的细胞培养液中ALB水平.流式细胞仪检测诱导后细胞白细胞表面抗原HLA-Ⅰ和HLA-Ⅱ.结果 从人脐带基质中分离培养的UC-MSCs在向肝细胞诱导分化培养体系的培养下,细胞形态由长梭形逐渐转化成为多角形或类圆形,并且表达AFP、ALB mRNA和蛋白,诱导后的UC-MSCs以时间依赖方式产生ALB,诱导后的细胞不表达HLA-DR.结论 UC-MSCs具有向肝细胞分化的潜能,分化后的M细胞仍具有低免疫原性.