人脐带间充质干细胞体外诱导分化为肝细胞样细胞及ERK1/2通路活化研究

摘要

目的 探讨人脐带间充质干细胞( hucMSC)体外诱导分化为肝细胞样细胞(HLC)的机制.方法 用组织块贴壁培养法分离、纯化和扩增hucMSC,观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志；经肝细胞生长因子(HGF)/碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)/抑瘤素M(OSM)联合诱导后,用RT-PCR、免疫荧光法检测肝细胞和hucMSC中特异基因AFP、ALB、TDO、CK18和ABCG2、CD44、OCT4及ALP、AFP、CK18蛋白的表达；用western blot检测经诱导后的hucMSC中ERK1/2信号通路活化情况.结果 流式细胞术结果表明,分离培养的hucMSC表达干细胞特异性标志CD13、CD29、CD44,不表达造血干细胞标志CD34、CD45和HLA-DR;RT-PCR结果表明,诱导后的hucMSC ALB、AFP、TDO、CK18基因表达增强,ABCG2、CD44、OCT4表达降低；免疫荧光结果表明,hucMSC可在体外诱导分化为具有肝系细胞表型细胞,其ALP、AFP、CK18蛋白表达增强；western blot结果表明诱导后hucMSC的ERK1/2磷酸化水平增加.结论 hucMSC可在体外诱导分化为HLC,其机制可能与ERK1/2磷酸化相关.