DKK1基因干扰对原发性肝细胞癌细胞增殖的影响及其机制探讨

摘要

目的：观察腺病毒介导的特异性抑制DKK1（ shDKK1）基因对原发性肝细胞癌（ HCC）细胞增殖的影响，并探讨其机制。方法设计合成3对DKK1基因的shRNA，筛选出最佳干扰片段，构建腺病毒载体Ad5．shDKK1。取对数生长期的人HCC细胞株SMMC-7721，分别转染Ad5．shDKK1（转染组）和Ad5．shCON（空载组）。采用MTT法检测细胞转染后24、48、72、96 h的相对增殖活力，采用Western blot法检测细胞Wnt信号通路中的β-链蛋白（β-catenin）、C-Myc、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、增殖细胞核抗原（PCNA）。结果转染组转染后24、48、72、96 h的细胞相对增殖活力分别为133．65％±11．30％、169．41％±4．64％、251．39％±13．86％、336．70％±16．62％，空载组分别为94．65％±1．77％、98．01％±3．28％、93．80％±2．26％、93．41％±2．22％；两组同时间点比较，P均＜0．01。转染组β-catenin、C-Myc、Cyclin D1、PCNA 分别为568．59％±25．36％、351．26％±13．43％、295．35％±45．56％、125．35％±23．61％，空载组分别为102．23％±4．53％、98．65％±7．89％、101．35％±9．23％、97．65％±6．87％，P均＜0．05。结论腺病毒介导的shDKK1基因能促进HCC细胞增殖，可能与激活Wnt信号通路有关。