体外血脑屏障的建立

摘要

目的：利用大鼠脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞于体外建立血脑屏障。方法分别取10只出生7～10 d、2只出生1～3 d的SD大鼠，断头处死后取脑组织，分别分离培养脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞，采用免疫细胞染色方法鉴定脑微血管内皮细胞，以脑微血管內皮细胞因子Ⅷ作为标记抗原，以神经胶质原纤维酸性蛋白（ GFAP）作为标记抗原鉴定星型胶质细胞。以非接触方式共培养脑微血管内皮细胞和星型胶质细胞的方法建立体外血脑屏障。接种12 d将电极插入待测Transwell小室（培养模型）、细胞培养液、空白Transwell小室（细胞培养液为媒介）。测定跨膜电阻、测算荧光素钠渗透系数（ Pe），衡量模型完整性。结果接种12 d时，模型、细胞培养液、空白Transwell小室的电阻值分别为180、64、112Ω／cm2。接种12 d时模型Pe为（4．67±0．4）×10－6 cm／s。结论成功建立体外血脑屏障，屏障效应较好、完整性较高。