低糖微环境对肝癌细胞生物钟基因表达的影响

摘要

目的 观察低糖微环境对肝癌细胞生物钟基因CLOCK、BMAL1、Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2表达的影响.方法 采用免疫组化染色法检测30例肝癌患者癌组织和癌旁组织中的生物钟基因CLOCK、BMAL1、Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2蛋白.分别将肝癌细胞Huh7和Bel-7404置入高糖和低糖微环境中培养24 h,Real-time PCR检测细胞中的CLOCK、BMAL1、Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2 mRNA.结果 肝癌组织中普遍存在生物钟基因蛋白表达异常,其中Pe1、Per2、Per3和Cry2蛋白呈低表达状态,它们在癌旁组织中的阳性率分别为86.7％(26/30),90％(27/30),86.7％(26/30),77.3％(22/30),在肝癌组织中的阳性率分别为33.3％(10/30),36.6％(11/30),36.6％(11/30),40.0％(12/30),两者相比,P均<0.05.在高糖环境培养的Huh7细胞中Clock、Per2 mRNA表达量分别为1.01±0.01、1.00±0.01,低糖环境培养的Huh7细胞中Clock、Per2 mRNA表达量分别为0.73±0.01、0.71±0.01,两者相比,P均<0.05;在高糖环境培养的Huh7细胞中Cry1 mRNA表达量为1.00±0.01,低糖环境培养的Huh7细胞中Cry1 mRNA表达量为1.35±0.02,两者相比,P<0.05;另一肝癌细胞Bel-7404中也表现出类似的变化.结论 肝癌组织中普遍存在生物钟基因蛋白表达异常(多呈低表达状态);肝癌细胞在低糖微环境中培养后,部分生物钟基因mRNA表达下调;低糖微环境可能是导致肝癌细胞生物钟紊乱的原因之一.