基质金属蛋白酶2基因野生型和G1207A突变型质粒构建与鉴定

摘要

目的 为研究基质金属蛋白酶2(MMP2)基因的功能,构建MMP2基因野生型与G1207A突变型质粒.方法 采用聚合酶链式反应(PCR)及定点突变技术扩增MMP2野生型基因、携带突变位点G1207A的MMP2基因,分别克隆入pUC57质粒中,进行DNA限制性内切酶谱和质粒测序鉴定.结果 MMP2基因野生型与G1207A突变型PCR扩增产物长度均为3416 bp,与理论值相符;重组质粒pUC57-MMP2、pUC57-p.Arg403His经DNA限制性内切酶谱和基因测序鉴定,MMP2基因野生型碱基序列与GenBank(NC_000016.10)上序列完全相同,G1207A突变型除1207位碱基G被A取代外,其他序列与MMP2基因野生型序列完全相同.结论 成功构建了pUC57-MMP2野生型和pUC57-p.Arg403His突变型质粒.