含有草苁蓉环烯醚萜苷的大鼠血清对人肝癌细胞增殖、凋亡影响及其机制

摘要

目的 观察含草苁蓉环烯醚萜苷(IGBR)的大鼠血清对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其机制.方法 Wistar雄性大鼠适应性饲养1周后,分别给予生理盐水和125、250、500 mg/kg的IGBR灌胃1个月后,心脏取血,获得浓度从低到高的含药血清.培养SMMC-7721细胞并随机分为对照组和实验1、2、3组,各组分别加入浓度从低到高的药物血清各20 μL.分别于给药24、48 h后观察SMMC-7721细胞形态,采用MTT法观察细胞增殖情况并测算增殖率.各组于给药48 h后,采用AO/EB双染荧光显微镜观察SMMC-7721细胞凋亡情况,采用流式细胞术测算细胞凋亡率;采用Western blotting法检测各组SMMC-7721细胞中的Bcl-2、Bax蛋白.结果 实验1、2、3组给药48 h后,细胞发生变性、坏死.给药24、48 h后实验1、2、3组OD值和细胞增殖率均低于对照组,且实验3组低于实验1组(P均<0.05).实验1、2、3组给药48 h后OD值和细胞增殖率低于同组给药后24 h(P均<0.05).给药48 h后,实验1、2、3组细胞呈凋亡形态;实验1、2、3组细胞凋亡率均高于对照组(P均<0.05).与对照组相比,实验1、2、3组Bcl-2蛋白表达量降低,Bax蛋白表达量增高(P均<0.05);与实验1组相比,实验3组Bcl-2蛋白表达量降低,Bax蛋白表达量增高(P均<0.05).结论 含IGBR的大鼠血清可抑制SMMC-7721细胞增殖,并促进细胞凋亡,作用与浓度呈正相关;其机制可能与Bcl-2蛋白表达下调、Bax蛋白表达增高有关.