利用Notch信号通路生物活性筛选模型分析海星中具有活性的化学成分

摘要

利用Notch信号通路生物活性筛选模型分离海星中具有活性的化学成分.将海星萃取物正丁醇萃取物分别稀释为10、1、0.1和0.01μg/mL,然后分别加入HEK293(TRE-luciferase)中培养后,使用酶标仪检测其相对荧光素酶值.将海星总皂苷粗提物通过正相硅胶、反相硅胶及葡聚糖凝胶LH-20柱层析进行分离纯化.最后选择RID示差折光检测器,色谱柱为Zorbax 300 SB-C18柱(9.4mm i.d.×250 mm)的半制备型高效液相色谱法纯化.正丁醇萃取部分对Notch信号通路有很好的抑制作用,进一步将正丁醇部分用正向硅胶柱层析进行初步纯化后,发现其Notch信号通路的抑制作用明显增强.这进一步说明具有Notch信号通路的抑制作用的物质可能主要存在于正丁醇萃取部分中.同时也提示了可能海星皂苷通过抑制Notch信号通路来起到抗肿瘤作用.纯化正丁醇萃取部分得到结晶单体化合物4个.