中华鳖酶解产物的理化性质及促成骨细胞增殖活性分析

摘要

本文使用碱性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶水解中华鳖骨和肉、壳和裙边制备中华鳖功能性肽,并对其主要构象变化、粒度等理化性质进行分析。同时通过测定各酶解物对MC3T3-E1细胞增殖情况的影响对其潜在的骨密度调节活性进行评价。结果显示,中华鳖壳和裙边干粉蛋白含量为54.18%,骨和肉干粉蛋白质含量为80.38%。酶解2 h后,碱性蛋白酶和胰蛋白酶的酶解产物分子量集中分布于1000 Da以下,胃蛋白酶酶解产物分子量分布较为均匀。酶解产物的结构以无规则卷曲为主,粒径集中分布于20和200 nm区域,说明酶解较为充分。酶解产物中赖氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸和苏氨酸等必需氨基酸的含量较高,非必需氨基酸中甘氨酸、丙氨酸和脯氨酸的含量相对较高。其中,胃蛋白酶酶解中华鳖骨和肉后必需氨基酸的总量达39.81%。细胞实验结果显示,六种酶解产物均有一定的促成骨细胞增殖活性,壳和裙边酶解物的增殖活性强于骨肉酶解物,其中胃蛋白酶酶解的壳和裙边产物活性最强,说明中华鳖酶解产物具有潜在的骨密度调节活性。本研究对于中华鳖等产品的深加工提供了可行性分析和理论参考。