复合酶提取石榴幼果总黄酮工艺优化及其抑制α-葡萄糖苷酶活性

摘要

优化复合酶(纤维素酶-果胶酶-木瓜蛋白酶)提取石榴幼果总黄酮的工艺,并测定其抑制α-葡萄糖苷酶活性.以总黄酮得率为评价指标,在单因素实验基础上,D-最优混料设计优化复合酶配比,正交试验设计对料液比、介质pH、酶解温度、酶解时间进行优化,并以PNPG为底物测定总黄酮对α-葡萄糖苷酶的抑制活性.结果 显示:复合酶最优配比为:纤维素酶44.2％、果胶酶31.6％、木瓜蛋白酶24.2％,最佳提取条件为:料液比1∶18 (g/mL)、介质pH5.0、酶解温度50℃、酶解时间4.0 h,总黄酮得率为3.38％,其浓度为1.5 mg/mL时,对α-葡萄糖苷酶抑制率达到63.9％,抑制作用的IC50为1.059 mg/mL,在浓度0.15～1.5 mg/mL范围内,石榴幼果总黄酮浓度与其对α-葡萄糖苷酶抑制效果之间呈现一定的正相关关系,其抑制机理属于可逆性抑制和非竞争性抑制.该方法可为石榴幼果总黄酮的提取和应用提供一定的科学依据.