酿酒酵母GSH Ⅰ基因的克隆、表达与结构分析

摘要

γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（GSHI）是合成谷胱甘肽的关键酶。通过构建GSHI活性较高的重组菌来提高合成GSH的能力。利用PCR技术扩增获得了酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）2-10515的gshI基因,构建原核表达载体pET-28a-gshI,转化到Escherichia coli BL21（DE3）中,重组菌经诱导表达后,测得GSHI的酶活力为46.09U/mg湿菌,活性较高。进一步利用生物信息学方法分析和预测GSHI基因的序列和蛋白结构,为在基因水平上提高该酶的表达量和活性提供了理论依据。