果胶酶在磁性复合载体上的固定化及其酶学性质

摘要

通过Fe3O4磁核与海藻酸钠明胶制备磁性复合载体,戊二醛交联后协同对果胶酶进行固定化,并研究固定化酶的酶学性质.利用正交实验优化固定化酶的制备条件,比较研究了固定化酶与溶液酶的酶学性质.结果表明:在Fe2+(5mol/L)∶Fe3+(5mol/L)体积比为0.75∶1的溶液中,制备Fe3O4磁核;3.5％海藻酸钠与3.0％明胶以2.5∶1的体积比,加入3.0mg/mL Fe3O4磁核量,在体积分数4.0％的戊二醛中交联2.5h;以每克载体加入20mg果胶酶,pH4.0下固定60rin,制备的固定化果胶酶活力回收率可达78.69％.固定化果胶酶最适pH为4.0,在pH3.0～7.0内稳定;最适温度50℃,在20～50℃具有较好的热稳定性;表观米氏常数Kmapp为3.162mg/mL;重复使用10次后,酶活力还剩51％,4℃下储存10d,酶活力还保留81％.说明以戊二醛交联磁性海藻酸钠明胶为复合载体制备的固定化果胶酶,机械强度大、弹性好,酶活力回收率高,操作稳定性好.