独活寄生汤含药血清抑制IL-1β诱导的软骨细胞炎症反应的机制研究

摘要

目的:探讨独活寄生汤含药血清抑制白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞炎症反应的机制.方法:采用机械-Ⅱ型胶原酶消化法从4周龄SD大鼠获取膝关节软骨细胞,Ⅱ型胶原免疫组化方法鉴定软骨细胞.将10只8周龄SD大鼠随机分为独活寄生汤组与空白组,每组5只,独活寄生汤组按9.3 g·kg-1·d-1剂量灌胃独活寄生汤,空白组灌服等量生理盐水,连续灌胃1周,末次给药1 h后腹主动脉采血,收集血清备用.将第3代软骨细胞分为正常组(10%空白血清的DMEM培养液干预)、模型组(含15 ng·mL-1 IL-1β的10%空白血清的DMEM培养液干预)、独活寄生汤组(含15 ng·mL-1 IL-1β的10%独活寄生汤含药血清的DMEM培养液干预),干预12 h后,分别采用免疫荧光技术和Western blot技术检测软骨细胞中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达变化.结果:Ⅱ型胶原免疫组化染色后软骨细胞胞浆呈棕黄色,为阳性.Western blot及免疫荧光染色结果显示,与正常组比较,模型组细胞中MMP-13表达明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,独活寄生汤组细胞中MMP-13表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论:独活寄生汤能抑制IL-1β诱导的软骨细胞炎症反应,延缓关节软骨的退变.