缺氧对脑脊液-视神经屏障中脑膜上皮细胞内质网和线粒体膜电位的影响

摘要

目的 探讨脑膜上皮细胞(meningothelial cells,MECs)参与视神经疾病的发病机理,研究缺氧对MECs功能变化的影响.方法 将培养的MECs分别在体积分数21％ O2(对照组)和体积分数1％O2(缺氧组)环境下孵育1d和2d,采用酶联免疫吸附实验测定和比较MECs的总抗氧化能力(total anti-oxidative capacity,T-AOC);采用MitoTracker Red检测和比较MECs在正常氧和缺氧环境下作用2d的线粒体膜电位的变化;通过测定钙联蛋白的荧光染色,以评价MECs暴露于氧化应激环境后对内质网功能的影响.结果 与对照组相比,缺氧组的氧化应激能力降低,结果显示T-AOC下降.对照组和缺氧组细胞分别培养1d后,细胞中T-AOC分别为(0.0124+0.001 1)U·L-1和(0.011 9 +0.009 0)U·L-1,差异无统计学意义(t=0.915、P=0.382).分别培养2d后,缺氧组细胞中T-AOC(0.010 7 +0.008 3)U·L-1低于对照组(0.012 9 +0.008 7)U·L-1,差异有统计学意义(t=4.616、P=0.001).不同氧环境作用于细胞2d后,采用共焦显微镜荧光探针方法分析作用于对照组和缺氧组的MECs线粒体膜电位的变化,结果发现缺氧组细胞荧光强度与对照组相比明显减低;同时通过荧光显微镜观察发现,缺氧组MECs钙联蛋白绿色荧光强度较对照组明显增强.结论 缺氧通过影响MECs内质网及线粒体功能而影响其氧化应激能力.