Rho/Rock信号转导通路中的关键因子RhoA、Rock Ⅰ、p-LMC在后发性白内障动物模型中的表达

摘要

目的 建立SD大鼠后囊膜混浊(posterior capsular opacification,PCO)动物模型,检测Rho/Rock通路中的关键因子RhoA、Rho激酶Ⅰ(Rho associated coiledcoil forming protein kinase-Ⅰ,Rock Ⅰ)和肌球蛋白轻链(phosphorylated myosin light chain,p-MLC)在PCO中的表达.探讨Rho/Rock通路在PCO形成过程中的作用.方法 选用健康SD大鼠30只,随机分为对照组(0d)和实验组(3d、7d、14 d、28 d),每个时间点各6只.所有大鼠(右眼)均行晶状体囊外摘出术,显微镜下观察不同时间点术眼前节的炎症反应及PCO发生情况.ELISA法检测不同时间点房水中TGF-β的表达.处死大鼠后摘除眼球行组织病理学检查,免疫组织化学和Western Blot法检测RhoA、Rock Ⅰ、p-MLC在晶状体后囊上的表达.结果 随着术后观察时间的推移,PCO混浊程度逐渐增加,HE染色显示晶状体上皮细胞不同程度的增生、移行.对照组术后0d、3d、7d、14 d、28 d房水中TGF-β的表达量分别为(37.28±1.31)μg·L-1、(40.29±3.17) μg·L-1、(42.12±3.45) μg·L-1、(60.42±4.75) μg·L-1、(68.69±8.06)μg·L-1,实验组各时间点与对照组相比,差异有统计学意义(F=137.158,P＜0.05);不同时间点两两相比,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).术后0d、3d、7d、14 d和28 d晶状体后囊膜上RhoA蛋白相对表达量(RhoA/GAPDH)分别为1.00±0.00、1.49±0.01、1.57±0.03、1.77±0.02和1.97±0.02,实验组各时间点与对照组相比,差异有统计学意义(F=94.546,P＜0.05);不同时间点两两相比,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).Rock Ⅰ蛋白的表达量(Rock Ⅰ/GAPDH)分别为1.00±0.00、0.35±0.12、1.42 ±0.14、1.78±0.09和1.95±0.14,实验组各时间点与对照组相比,差异有统计学意义(F=30.942,P＜0.05);不同时间点两两相比,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).p-MLC蛋白的相对表达量(p-MLC/GAPDH)分别为1.00±0.00、1.44±0.08、1.47±0.13、1.63±0.10和2.12±0.20,实验组各时间点与对照组相比,差异有统计学意义(F =34.313,P＜0.05);不同时间点两两相比,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 RhoA、Rock Ⅰ、p-MLC在PCO形成过程中表达逐渐增多,Rho/Rock信号转导通路可能与PCO的发生、发展有关.