甲型肝炎病毒抗原蛋白的制备与分析

摘要

目的提取并制备甲型肝炎病毒（hepatitis A virus, HAV）抗原蛋白,了解、分析其主要成分和性质。方法利用人胚肺二倍体细胞培养并收获HAV,释放并初步提取病毒抗原;采用阴离子交换层析和分子筛层析等方法纯化制备HAV抗原蛋白;再利用凝胶电泳（gel electrophoresis）和Western印迹法（Western Blot）对蛋白成分和性质进行分析。结果初步提取的HAV抗原回收率为87.50%,蛋白质去除率为87.88%。纯化后的HAV抗原蛋白的电泳显示HAV抗原蛋白主要由3条蛋白带组成,相对分子质量分别为33 000、29 000和25 000;Western Blot结果显示,相对分子质量为33 000和29 000的2条蛋白带可与抗体反应。结论实验提取并制备了HAV抗原蛋白,其电泳条带的相对分子质量与HAV衣壳蛋白VP1、VP3和VP2的相对分子质量相当,其中两条蛋白带可与抗体发生免疫反应,含有主要的抗原表位。