用PCR检测细胞培养中支原体污染

摘要

细胞培养中支原体污染已经成为严重的问题，为了扩增６种支原体（精氨酸支原体、口腔支原体，人型支原体，猪鼻支原体，发酵支原体及莱氏支原体）核糖体ＲＮＡ操纵子的１６ｓ和２３ｓＤＮＡ间区设计了三个通用ＰＣＲ引物（Ｆ１，Ｆ２及Ｒ１），当以６种支原体ＤＮＡ为模板时，引物Ｆ１和Ｒ１产生３４０到４６８ｂｐ的片段，引物Ｆ２和Ｒ１产生１４５到２１１ｂｐ的片段，当用Ｈｅｌａ细胞或Ｅ．ｃｏｌｉ ＤＮＡ作为模板，用引物Ｆ１