专一性酶解-高效液相色谱-荧光检测法测定3种食用油中4种多环芳烃

摘要

称取食用油(动物油、植物油或经用于煎炸的食用油)2.0 g与pH 8.0磷酸盐缓冲溶液5 mL和脂肪酶0.2 g混匀后,于(37±2)℃振荡酶解2 h.加入碳酸钾1.0 g皂化样品中的脂肪,以及乙醇5 mL使在后续的提取中降低溶液的乳化现象.于此溶液中加入水5 mL及正己烷提取4种多环芳烃{PAHs,即苯并[a]蒽(BaA)、苯并[b]荧蒽(BbF)、苯并[k]荧蒽(BkF)和苯并[a]芘(BaP)}2次,每次用正己烷15 mL,振荡5 min,离心5 min,移取上层提取液,合并后于40℃旋蒸至干.用乙腈溶解残渣并定容至1.0 mL,此溶液经0.22μm滤膜过滤,取滤液供在仪器工作条件下进行高效液相色谱(HPLC)分离后测定.选择Dikma Plus C18色谱柱为固定相,以不同体积比的(A)水和(B)乙腈的混合液为流动相进行梯度洗脱.上述4种PAHs的保留时间依次为9.3,12.0,12.6,13.9 min.用荧光检测器分别测定其发射荧光的强度.在此4种PAHs中,BaA的荧光发射波长(λem)为380 nm,BbF、BkF和BaP的λem在406 nm波长处.分别取上述3种食用油的空白样品作为基体,加入加4种PAH的混合标准溶液系列制作标准曲线,测得其线性范围在相同的区间(0.1～5.0μg?L-1),其检出限(3S/N)为0.03μg?kg-1.分别以3种食用油样品作为基体,按标准加入法进行回收试验,测得其回收率均在90.0％以上,测定值的相对标准偏差(n=5)均小于9.0％.