高效液相色谱-荧光检测法

摘要： 为了检测动物源性食品中氟喹诺酮类药物(沙拉沙星、环丙沙星、恩诺沙星)的残留量,本文对高效液相色谱-荧光检测法进行了优化。样品经无水硫酸钠除水,酸化乙腈提取,乙腈饱和的正己烷脱脂,采用0.05 mol/L的磷酸溶液(三乙胺调pH至2.4)-乙腈流动相进行复溶。结果表明,3种氟喹诺酮类药物在5~300 ng/mL呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.999;在4~80μg/kg的加标浓度下,回收率为62.80%~94.45%,相对标准偏差为0.29%~5.30%。表明方法适用于动物源性食品中氟喹诺酮类药物残留量的检测。

摘要： 目的:按照《化学药品注射剂生产所用的塑料组件系统相容性研究技术指南(试行)》和《化学药品与弹性体密封件相容性研究技术指导原则(试行)》要求,对生产所用塑料组件中可能含有的6个多环芳烃类物质(PAHs)进行模拟提取及安全评估,并应用迁移试验对下游产品棓丙酯注射液中的相关成分进行测定。方法:采用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD法),使用Kromasil 100-5-C(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(70∶30,v/v),流速1.2 mL·min,柱温35°C,进样量60μL。FLD激发波长(Ex)分别为270 nm(萘)、250 nm(菲、蒽)、238 nm(芘)、286 nm(苯并[α]蒽)、262 nm(苯并[α]芘),FLD发射波长(Em)分别为335 nm(萘)、380 nm(菲、蒽)、390 nm(芘)、397 nm(苯并[α]蒽)、413 nm(苯并[α]芘)。结果:6个PAHs在各自浓度范围内线性关系良好(r≥0.9979);检测限为0.005~0.037 ng;回收率在99.86%~102.16%,RSD<4%(n=9)。密封件的提取试验结果显示,50%乙醇溶液中能检出多个PAHs,而pH 10缓冲液及注射液的高温高压提取液中能检出微量萘。注射液的迁移试验结果显示,棓丙酯注射液只能迁移进入微量萘,迁移量远低于分析评价阈值(AET)。结论:所用HPLC-FLD法简便、准确,专属性强,灵敏度高,可适用于生产所用塑料组件模拟提取液和注射液中6个PAHs的含量测定。

摘要： 目的:建立测定大鼠血浆和脑组织中司替戊醇(STP)质量浓度的方法,并比较STP及其自纳米乳在血浆、脑组织中的药物浓度.方法:以占吨酮为内标,采用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLR)测定.色谱柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-25 mmol/L KH2PO4水溶液[44:56(V/V),pH 2.6],流速为1.5 mL/min,激发波长为210 nm,发射波长为400 nm,柱温为30°C,进样量为10μL.将36只大鼠随机分为两组,每组18只,分别灌胃STP自纳米乳和STP混悬液(40 mg/kg,均以STP计).于给药后0.5、1、2 h时采集大鼠血液和脑组织样品(各时间点每组各6只),经乙腈沉淀蛋白(脑组织需先进行匀质)等处理后,采用上述色谱条件检测STP的质量浓度并比较.结果:STP在血浆、脑组织中药物浓度检测的线性范围均为0.02～8.00μg/mL(r分别为0.9996、0.9994),定量下限均为0.02μg/mL;日内、日间RSD均小于5％,提取回收率和方法回收率均不低于90％.与STP混悬液组比较,STP自纳米乳组大鼠各时间点的血药浓度(给药后1 h除外)、脑组织中药物浓度(给药后2 h除外)均显著升高(P<0.05),且两者(以STP自纳米乳为对象)具有明显的线性关系.结论:所建HPLC-FLR法的灵敏度、精密度较高,可用于研究STP及其自纳米乳在大鼠血浆和脑组织中的分布情况;将STP制成自纳米乳后,其在血浆、脑组织中的药物浓度明显提高.

摘要： 为了研究牧草及藻体内脂肪酸组成的差异,本研究以N-乙基-N,-[(3-二甲氨基)丙基]碳二亚胺盐(EDC)的乙腈溶液为催化剂,采用新型荧光试剂10-甲基吖啶酮-2-磺酰哌嗪(MASP)作为柱前衍生试剂,对19种混合脂肪酸进行优化衍生,以λex=315 nm和λem=430 nm分别为荧光检测的激发和发射波长,采用梯度洗脱,实现了对19种混合脂肪酸的完全基线分离及定量分析.结果显示,多数脂肪酸的线性回归系数大于0.99,且检出限在17.6～42.7 ng·mL-1(S/N=3:1).上述方法具有良好的重现性,能够满足高寒沼泽牧草及藻体样品中脂肪酸测定的需要.

摘要： 为探究传统中式火腿加工过程中不同形态N-羟乙酰神经氨酸(N-glycolylneuraminic acid,Neu5Gc)之间的关系,采用高效液相色谱-荧光检测(high performance liquid chromatography-fluorescence detector,HPLC-FLD)法测定样品中总Neu5Gc、游离态Neu5Gc、结合态Neu5Gc的含量.结果表明:上述3种形态的Neu5Gc含量随着加工时间的延长均呈前期上升后期降低的趋势;浅层肌肉半膜肌和深层肌肉股二头肌中总Neu5Gc和结合态Neu5Gc的含量变化规律相似,因水分含量降低程度的不同而使股二头肌的变化规律滞后.发酵后期水分损失幅度变缓,股二头肌中Neu5Gc解离速率高于半膜肌;新鲜猪后腿原料中游离态Neu5Gc含量极少,甚至低于检测限,结合态Neu5Gc含量与总Neu5Gc含量(15.00～30.62μg/g)接近.发酵半年、1年和2年的火腿中总Neu5Gc含量分别为(15.09±0.39)、(14.52±0.38)、(28.30±0.43)μg/g,均与猪后腿原料中的Neu5Gc含量相近.为进一步探究Neu5Gc的变化,对样品进行冷冻干燥处理以避免水分含量变化对Neu5Gc含量的影响,结果表明,随着加工时间的延长,总Neu5Gc、结合态Neu5Gc的含量逐渐降低,且发酵期降低明显,具有显著差异性(P<0.05);游离态Neu5G变化无明显规律,但与空白样品相比,其含量呈增加趋势.

摘要： 称取食用油(动物油、植物油或经用于煎炸的食用油)2.0 g与pH 8.0磷酸盐缓冲溶液5 mL和脂肪酶0.2 g混匀后,于(37±2)°C振荡酶解2 h.加入碳酸钾1.0 g皂化样品中的脂肪,以及乙醇5 mL使在后续的提取中降低溶液的乳化现象.于此溶液中加入水5 mL及正己烷提取4种多环芳烃{PAHs,即苯并[a]蒽(BaA)、苯并[b]荧蒽(BbF)、苯并[k]荧蒽(BkF)和苯并[a]芘(BaP)}2次,每次用正己烷15 mL,振荡5 min,离心5 min,移取上层提取液,合并后于40°C旋蒸至干.用乙腈溶解残渣并定容至1.0 mL,此溶液经0.22μm滤膜过滤,取滤液供在仪器工作条件下进行高效液相色谱(HPLC)分离后测定.选择Dikma Plus C18色谱柱为固定相,以不同体积比的(A)水和(B)乙腈的混合液为流动相进行梯度洗脱.上述4种PAHs的保留时间依次为9.3,12.0,12.6,13.9 min.用荧光检测器分别测定其发射荧光的强度.在此4种PAHs中,BaA的荧光发射波长(λem)为380 nm,BbF、BkF和BaP的λem在406 nm波长处.分别取上述3种食用油的空白样品作为基体,加入加4种PAH的混合标准溶液系列制作标准曲线,测得其线性范围在相同的区间(0.1～5.0μg?L-1),其检出限(3S/N)为0.03μg?kg-1.分别以3种食用油样品作为基体,按标准加入法进行回收试验,测得其回收率均在90.0％以上,测定值的相对标准偏差(n=5)均小于9.0％.

摘要： 目的 建立超高效液相色谱荧光(ultra performance liquid chromatography-fluorescence detection,UPLC-FLD)检测海产品中苯并(a)芘[benzo(a)pyrene,BaP]的方法.方法 乙腈加速溶剂萃取提取冻干海产品中的BaP,提取液用UPLC-FLD测定,多环芳烃色谱柱(150 mm×2.1 mm,3μm)分离,乙腈-水(75:25,V:V)为流动相,流速1 mL/min,激发波长261 nm,发射波长450 nm.结果 BaP在0.2～40μg/kg浓度范围内线性良好,相关系数r2=0.9998,回收率98.3％,相对标准偏差为1.34％,最低检出限0.06μg/kg,实际样品检测良好.结论 该法简便快捷,溶剂用量少,灵敏度高,可用于海产品中BaP的检测.

摘要： 目的 建立高效液相色谱-荧光检测法测定植物性食品如蔬菜、水果及粮食中多环芳烃含量,了解河北省内上述食品中14种欧盟优控多环芳烃的实际污染状况.方法 样品经环己烷-乙酸乙酯(1:1,V:V)溶液超声提取后,浓缩至近干,经正己烷复溶后通过多环芳烃专用固相萃取柱进行净化处理,洗脱液经浓缩后用乙腈定容,采用高效液相色谱-荧光检测法进行检测.结果 14种化合物的线性范围为1.00～18.0μg/kg;方法回收率为60.9％～125.4％,相对标准偏差为2.2％～7.6％;苯并(c)芴、苯并(a)蒽、?、5-甲基-1,2-苯并菲、苯并(j)荧蒽、苯并(b)荧蒽、苯并(k)荧蒽、苯并(a)芘、二苯并(a,e)芘、二苯并(a,i)芘、二苯并(a,h)芘检出限为0.15μg/kg;二苯并(a,l)芘、二苯并(a,h)蒽、苯并(g,h,i)苝、茚并(1,2,3-cd)芘检出限为0.30μg/kg.市售的96份样品中,检出不同种类不同含量的多环芳烃类化合物,检出率为51.0％.结论 本方法重现性好,检测灵敏度高,可用于水果、蔬菜及粮食中14种多环芳烃的检测.

摘要： 目的:分别测定非小细胞肺癌患者体内长春瑞滨的血浆及全血浓度,并应用其计算临床病人的药代动力学参数.方法:10例临床肺癌病人分别给予长春瑞滨40mg后,分别于给药前及给药后1、6、18、24、48和72h采取1ml血浆(0.5ml全血),经过两次液-液萃取,利用HPLC荧光检测法测定其给药后不同时刻的血药浓度,并应用3P87程序拟合房室模型,考察其体内药动学特点.结果:长春瑞滨在中国病人体内过程符合2室模型,与国外报到的3室模型略有不同.根据其血浆和全血浓度求得的药动学参数分别为:AUC为(530.99±88.56) h·ng/ml和(904.91±194.97)h·ng/ml,t1/2β为(33.70±1.58)h和(40.40±21.30)h.结论:国外报到长春瑞宾的体内药动学符合三室模型,其半衰期较长(20～40h);本文研究的多数个体其体内过程符合二室模型,但主要药动学参数与国外报道基本一致.

摘要： 目的:分别测定非小细胞肺癌患者体内长春瑞滨的血浆及全血浓度,并应用其计算临床病人的药代动力学参数.方法:10例临床肺癌病人分别给予长春瑞滨40mg后,分别于给药前及给药后1、6、18、24、48和72h采取1ml血浆(0.5ml全血),经过两次液-液萃取,利用HPLC荧光检测法测定其给药后不同时刻的血药浓度,并应用3P87程序拟合房室模型,考察其体内药动学特点.结果:长春瑞滨在中国病人体内过程符合2室模型,与国外报到的3室模型略有不同.根据其血浆和全血浓度求得的药动学参数分别为:AUC为(530.99±88.56) h·ng/ml和(904.91±194.97)h·ng/ml,t1/2β为(33.70±1.58)h和(40.40±21.30)h.结论:国外报到长春瑞宾的体内药动学符合三室模型,其半衰期较长(20～40h);本文研究的多数个体其体内过程符合二室模型,但主要药动学参数与国外报道基本一致.

摘要： 目的:分别测定非小细胞肺癌患者体内长春瑞滨的血浆及全血浓度,并应用其计算临床病人的药代动力学参数.方法:10例临床肺癌病人分别给予长春瑞滨40mg后,分别于给药前及给药后1、6、18、24、48和72h采取1ml血浆(0.5ml全血),经过两次液-液萃取,利用HPLC荧光检测法测定其给药后不同时刻的血药浓度,并应用3P87程序拟合房室模型,考察其体内药动学特点.结果:长春瑞滨在中国病人体内过程符合2室模型,与国外报到的3室模型略有不同.根据其血浆和全血浓度求得的药动学参数分别为:AUC为(530.99±88.56) h·ng/ml和(904.91±194.97)h·ng/ml,t1/2β为(33.70±1.58)h和(40.40±21.30)h.结论:国外报到长春瑞宾的体内药动学符合三室模型,其半衰期较长(20～40h);本文研究的多数个体其体内过程符合二室模型,但主要药动学参数与国外报道基本一致.

摘要： 目的:分别测定非小细胞肺癌患者体内长春瑞滨的血浆及全血浓度,并应用其计算临床病人的药代动力学参数.方法:10例临床肺癌病人分别给予长春瑞滨40mg后,分别于给药前及给药后1、6、18、24、48和72h采取1ml血浆(0.5ml全血),经过两次液-液萃取,利用HPLC荧光检测法测定其给药后不同时刻的血药浓度,并应用3P87程序拟合房室模型,考察其体内药动学特点.结果:长春瑞滨在中国病人体内过程符合2室模型,与国外报到的3室模型略有不同.根据其血浆和全血浓度求得的药动学参数分别为:AUC为(530.99±88.56) h·ng/ml和(904.91±194.97)h·ng/ml,t1/2β为(33.70±1.58)h和(40.40±21.30)h.结论:国外报到长春瑞宾的体内药动学符合三室模型,其半衰期较长(20～40h);本文研究的多数个体其体内过程符合二室模型,但主要药动学参数与国外报道基本一致.

摘要： 目前，对邻氨基苯甲酸甲酯的分析有分光光度法、气相色谱法、液相色谱法等，这些方法多用于邻氨基苯甲酸甲酯含量较高的果汁分析，用于白兰地酒中痕量邻氨基苯甲酸甲酯的分析报道较少。该文通过选择最佳色谱条件，大大提高了检测灵敏度，无需样品处理，简便快速。

摘要： 目前，对邻氨基苯甲酸甲酯的分析有分光光度法、气相色谱法、液相色谱法等，这些方法多用于邻氨基苯甲酸甲酯含量较高的果汁分析，用于白兰地酒中痕量邻氨基苯甲酸甲酯的分析报道较少。该文通过选择最佳色谱条件，大大提高了检测灵敏度，无需样品处理，简便快速。

摘要： 目前，对邻氨基苯甲酸甲酯的分析有分光光度法、气相色谱法、液相色谱法等，这些方法多用于邻氨基苯甲酸甲酯含量较高的果汁分析，用于白兰地酒中痕量邻氨基苯甲酸甲酯的分析报道较少。该文通过选择最佳色谱条件，大大提高了检测灵敏度，无需样品处理，简便快速。

摘要： 本发明公开了一种同时检测白果中吡哆醛和吡哆醇的超高效液相色谱‑荧光法（UPLC‑FLD）。白果在我国用作食物和药材已经具有上千年的历史，吡哆醛和吡哆醇是白果中一类重要天然药物成分，具有调节免疫应答、抗肿瘤和抗氧化活性的功能。但近年来有研究报道吡哆醛类物质及其衍生物是引起白果不良反应甚至毒性反应的主要原因之一。本发明采用ZIF‑8有机金属骨架材料作为净化材料，结合UPLC‑FLD分析技术，可简单、快速、灵敏地检测白果中吡哆醛和吡哆醇，仪器检测限分别为0.012 mg/L和0.010mg/L，为白果药材的质量控制及安全评估提供技术手段。

摘要： 本发明公开了一种高效液相荧光色谱法检测水中微囊藻毒素‑LR的方法，具体涉及一种高效液相荧光色谱法检测水中微囊藻毒素‑LR的方法，属于水环境监测技术或农业监测技术领域。本发明基于微囊藻毒素‑LR能够在紫外光照射下激发出荧光的特点，通过对样品进行过滤、富集、洗脱、浓缩定容，采用高效液相荧光色谱方法实现水体中微囊藻毒素‑LR的快速、准确、高效的检测，对水体污染情况的监测、治理和保护都具有指导意义。

摘要： 利用HPLC‑FLD法分析检测燕麦生物碱(N‑(肉桂酰)邻氨基苯甲酸类化合物)，此技术是利用该类化合物的荧光特性，即激发波长为330nm，发射波长为430nm，以燕麦生物碱结构类似物‑曲尼司特作为标准参照物，建立燕麦生物碱的HPLC‑FLD分析方法。方法：1.HPLC‑FLD分析曲尼司特的最佳液相条件：Prosphere C18色谱柱(5μm，4.6nm×250nm)，流动相为38％乙腈和水(含10mM乙酸)，柱温30°C，进样量10μL；荧光检测条件：激发波长330nm，发射波长430nm。2.燕麦麸皮经溶剂分级萃取、大孔树脂层析，得到燕麦生物碱提取物，HPLC‑FLD分析燕麦生物碱的最佳液相条件同1，梯度洗脱程序：0‑4min(5％B‑36％B，95％A‑64％A)，4‑50min(36％B‑50％B，64％A‑50％A)，50‑60min(50％B‑50％B，50％A‑50％A)。荧光检测条件：激发波长330nm，发射波长430nm。

摘要： 本测定方法是利用高效液相色谱－荧光法测定水产品中氟苯尼考的残留。水产品样品中氟苯尼考用乙酸乙酯提取，经正己烷去脂、浓缩后，C

摘要： 本发明提供一种附子的高效液相色谱检测方法及高效液相色谱串联质谱联用检测方法，属于药物检测技术领域，所述高效液相色谱检测方法是取附子供试品溶液利用0.04mol/L的乙酸铵‑乙腈作为流动相进行高效液相色谱检测，即得检测结果；所述高效液相色谱质谱联用检测方法利用上述附子的高效液相色谱检测条件进行检测。本发明通过调整色谱条件及附子的前处理过程，再分别采用高效液相色谱检测方法及高效液相色谱串联质谱联用检测方法对附子进行检测，能够有效将活性成分分离并检出。

摘要： 本发明公开了测定垃圾渗滤液中全氟辛酸浓度的高效液相色谱荧光检测法，包括以下步骤：(1)取一定体积的渗滤液样品经前处理后得到A溶液；(2)将步骤(1)中得到的A溶液定容至10mL，加入1mL、5mg/mL的衍生剂丙酮溶液，然后在70°C的恒温水浴中催化反应150min得到荧光衍生物溶液；(3)取1mL荧光衍生物溶液采用Zorbax Eclicpse Plus C18为色谱柱，以乙腈‑水为流动相，上机进行测定，记录峰面积，根据公式计算得到步骤(2)中全氟辛酸浓度，然后间接计算出垃圾渗滤液中全氟辛酸的浓度。本发明具有灵敏度高、检出限较低、衍生剂的成本较低、方法简单等优点。

摘要： 本发明公开了一种同时测定烟用香精香料中4种禁限用添加剂的高效液相色谱荧光检测法，先将烟用香精香料用乙醇进行振荡萃取，静置后过0.45μm有机相滤膜，得到待测样品溶液；同时配制4种禁限用添加剂的标准溶液，再采用高效液相色谱荧光检测仪分别对待测样品溶液和标准溶液进行检测分析，然后以外标法进行定量分析，计算出烟用香精香料中4种禁限用添加剂的含量；所述4种禁限用添加剂为芝麻酚、β-萘酚、β-细辛醚和黄樟素。本发明实现了烟用香精香料中4种禁限用添加剂的同时测定。由于使用了酚类专用色谱柱，检测时间更短；采用荧光检测器，选择性也较高，基质干扰较小，检出限更低；且前处理不需要除水，操作更为简单。

摘要： 本发明公开了测定垃圾渗滤液中全氟辛酸浓度的高效液相色谱荧光检测法，包括以下步骤：(1)取一定体积的渗滤液样品经前处理后得到A溶液；(2)将步骤(1)中得到的A溶液定容至10mL，加入1mL、5mg/mL的衍生剂丙酮溶液，然后在70°C的恒温水浴中催化反应150min得到荧光衍生物溶液；(3)取1mL荧光衍生物溶液采用Zorbax Eclicpse Plus C18为色谱柱，以乙腈‑水为流动相，上机进行测定，记录峰面积，根据公式计算得到步骤(2)中全氟辛酸浓度，然后间接计算出垃圾渗滤液中全氟辛酸的浓度。本发明具有灵敏度高、检出限较低、衍生剂的成本较低、方法简单等优点。

摘要： 本发明公开了一种同时测定烟用香精香料中4种禁限用添加剂的高效液相色谱荧光检测法，先将烟用香精香料用乙醇进行振荡萃取，静置后过0.45μm有机相滤膜，得到待测样品溶液；同时配制4种禁限用添加剂的标准溶液，再采用高效液相色谱荧光检测仪分别对待测样品溶液和标准溶液进行检测分析，然后以外标法进行定量分析，计算出烟用香精香料中4种禁限用添加剂的含量；所述4种禁限用添加剂为芝麻酚、β-萘酚、β-细辛醚和黄樟素。本发明实现了烟用香精香料中4种禁限用添加剂的同时测定。由于使用了酚类专用色谱柱，检测时间更短；采用荧光检测器，选择性也较高，基质干扰较小，检出限更低；且前处理不需要除水，操作更为简单。

摘要： 本发明公开了水产品中氨苄青霉素和阿莫西林残留量的高效液相色谱荧光检测法，属食品安全检测领域，操作步骤是1、制备标准液；2、抽样，经捣碎取不少于500克样品，均分二份在-18°C下保存；3、提取，取5克样品，加入磷酸二氢钠，加水溶至500毫升，制备成提取液30毫升，二次均质离心取上清液，加三氯乙酸作备用液；4、净化，依次用甲醇、蒸馏水、三氯乙酸润洗，控制20滴/min，抽干后用5毫升乙腈洗脱；5、衍生，40°C下氮气吹干，取0.5毫升标准液加入三氯乙酸和7%甲醛溶液混匀，密封置于沸水浴中加热30min，冷却后用乙腈洗脱溶液定容至1ML，过滤后供液相色谱检测，检测限小于5μg/kg。